草鱼消化道碱性蛋白酶的提取及鉴定

摘要：

用丙酮将草鱼肠脱脂,磷酸盐缓冲溶液提取粗酶液,再用10%～40%饱和度的硫酸铵分级沉淀制取粗草鱼消化道碱性蛋白酶.粗草鱼碱性蛋白酶的比活力为2 800 U/g.最适作用温度为37%2,最适作用pH为10.3.在50℃保温30 min后还保留60%以上的酶活力,要使其损失约80%的活力,需要在60℃保温30 min.50 mmol/L的甲苯磺酰赖氨酸氯甲酮(TLCK)、甲苯磺酰氟(PMSF)和50 μmol/L大豆胰蛋白酶抑制因子(SBTI)分别抑制78.92%、75.98%和80.23%的酶活力.SDS-底物-聚丙烯酰胺凝胶电泳表明碱性蛋白酶的活性成分有4种,一种为非丝氨酸蛋白酶,相对分子质量为105 000;另外三种为胰蛋白酶,相对分子质量分别为26 400、30 750和43 000.

关键词：草鱼、碱性蛋白酶、提取、SDS-底物-聚丙烯酰胺凝胶电泳

所属期刊栏目：26

分类号：Q556.1;Q176(酶)

资助基金：湖南省教育厅资助项目02C580

在线出版日期：2007-12-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：221-226