猪繁殖与呼吸综合征病毒M蛋白的表达及其单克隆抗体的制备

摘要：

@@ 猪繁殖与呼吸综合征(porcine reproductive and respiratory syndrome,PRRS)是以妊娠母猪繁殖失败和仔猪出现呼吸困难为特征的传染病,PRRSV是该病的病原体.将PRRSV CH-1a株ORF6基因疏水性较强的区域删除后,克隆于pGEX-6p-1载体中,转化大肠杆菌,并进行诱导表达.经SDSPAGA分析发现,表达了Mr约为37 000的融合蛋白rtM,Western blot分析证实,重组蛋白能被PRRSV抗血清所识别.收获融合表达的rtM,按50μg/只的剂量与等量弗氏佐剂乳化后,经腹腔接种BALB/c小鼠,免疫3次后,取其脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞进行融合,用rtM作为包被抗原,通过间接ELISA方法筛选阳性克隆,结果获得了1株能稳定分泌抗rtM蛋白抗体的杂交瘤细胞株,将其命名为M2B3.间接免疫荧光检测结果发现,所获得的单克隆抗体能与PRRSV感染细胞产生特异性免疫荧光.亚型鉴定结果显示,单克隆抗体M2B3为IgG1型,其轻链均为κ链.研究获得的融合蛋白rtM及单克隆抗体将为今后深入研究PRRSV病毒结构和功能,分析M蛋白的抗原表位等提供有益帮助.

关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒、M蛋白、表达、单克隆抗体

所属期刊栏目：25

分类号：S8(畜牧、动物医学、狩猎、蚕、蜂)

资助基金：国家重点基础研究发展计划973计划2005CB523200;国家自然科学基金30470072

在线出版日期：2006-11-07（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共2页

页码：212-212,214