pfl-act基因在大肠杆菌中的高效表达及其纯化

摘要：

丙酮酸甲酸裂解酶是肠道细菌在厌氧代谢中十分关键的酶,丙酮酸甲酸裂解酶激活因子(pyruvate formate lyase activator,PFL-A)在功能上具有重要的作用.为进一步研究PFL-A的激活机理,以大肠杆菌K-12的基因组为模板,通过GenBank上公布的序列设计引物,扩增出目的基因,克隆到pMD18-T载体,经测序,所扩增出的基因与pfl-act基因具有99%的同源性.将pfl-act连接到高效表达载体pET-22b(+)中,经异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导,结果发现,pfl-act以包涵体形式表达.改变诱导剂、诱导剂量或培养温度,对包涵体的形成均没有明显的影响.

关键词：丙酮酸甲酸裂解酶激活因子、包涵体、高效表达

所属期刊栏目：25

分类号：Q782(基因工程（遗传工程）)

资助基金：国家高技术研究发展计划863计划2003AA001039

在线出版日期：2007-01-22（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：285-289