沙田柚黄龙病病原16S rDNA片段的克隆与序列分析

摘要：

采集田间表现斑驳症状的沙田柚叶脉,用CTAB法提取总DNA.根据柑橘黄龙病病原16S rDNA的核苷酸序列设计引物P1/P2,进行PCR扩增,获得1条大小为1 167 bp的片段.酶切分析显示,该片段可被切成大小分别约为640 bp和520 bp的2个片段.扩增产物经纯化,与pMD18-T Vector连接,转化大肠杆菌(Escherichia coli)DH 5α,筛选克隆重组子.对PCR产物进行测序及序列分析,结果表明,与柑橘黄龙病病原亚洲种16S rDNA的同源性为99%,与非洲种的同源性为97%,与美洲种的同源性为96%.认为,沙田柚的斑驳症状是由黄龙病病原引致的,称之为沙田柚黄龙病.该沙田柚黄龙病病原属于柑橘黄龙病病原亚洲种(Liberobacter asiaticus)中的一个成员.系统进化树分析显示,沙田柚黄龙病病原与中国柑橘黄龙病病原亲缘关系最近,推测是直接来自中国柑橘黄龙病病原.

关键词：沙田柚、黄龙病、16S、rDNA、克隆、序列分析

所属期刊栏目：25

分类号：S436.66(病虫害及其防治)

资助基金：广东省博士启动基金032262;国家高性能计算基金2004B20901010

在线出版日期：2006-08-09（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：107-110,124