香蕉乙烯受体基因RNA干扰表达载体的构建

摘要：

设计两对引物, PCR扩增香蕉乙烯受体基因cDNA序列自AUG启始密码子起长538 bp区段的正向(记为5'I)、反向(记为AI')DNA区段.构建含该正、反向互补重复序列DNA片段的中间载体,经测序证实连接正确后,克隆到植物表达载体pCAMBIA-1301中的GUS基因位置并经双酶切证实.在所得表达载体pCAMBIA-1301-S5'I-AI'中,该插入正反互补重复片段处于35S启动子之后,由此转录的mRNA因两端序列反向互补而形成发夹式RNA,因此可应用于RNA 干扰研究.同时,文中对构建含正、反向重复序列插入片段植物表达载体过程中出现的插入片段链内退火引起连接困难等问题进行了分析讨论.

关键词：乙烯受体基因、RNA干扰、植物表达载体、香蕉

所属期刊栏目：23

分类号：Q52(核酸)

资助基金：国家自然科学基金3006008;广西大学校科研和教改项目

在线出版日期：2004-08-18（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：149-153