生牛乳中高黏液型肺炎克雷伯菌耐药、毒力及生物被膜形成能力分析

摘要：

[目的]评估分离自生牛乳及其环境中高黏液型肺炎克雷伯菌(hypermucoviscous Klebsiella pneumoniae,hmKP)的生物被膜形成能力及耐药毒力风险,对其可能引起的潜在风险提出警示,进而为肺炎克雷伯菌(KP)的科学防治提供理论参考.[方法]采用药敏纸片法鉴定32株hmKP产超广谱 β-内酰胺酶(ESBLs)表型,以半定量结晶紫法检测其生物被膜形成能力,并通过PCR对hmKP携带的耐药基因和毒力基因进行检测分析.[结果]从32株hmKP中共鉴定出ESBLs阴性菌株(non-ESBLs-KP)24株(占75.00％)、ESBLs阳性菌株(ESBLs-KP)8株(占25.00％),均可形成生物被膜,其中,10株具有强生物被膜形成能力,17株具有中等生物被膜形成能力,5株表现为弱生物被膜形成能力.在10株具有强生物被膜形成能力的hmKP中有7株来自生牛乳样本,且ESBLs-KP中具有强生物被膜形成能力的菌株检出率(37.50％)高于non-ESBLs-KP中的检出率(29.17％).所有hmKP至少携带4种以上的耐药基因,其耐药风险排序依次为四环素类=氨基糖苷类>β-内酰胺类>磺胺类>喹诺酮类>氯霉素类,其中ESBLs-KP均携带8种以上的耐药基因;32株hmKP共表现出30种基因谱类型,无明显的优势耐药基因谱类型.在32株hmKP中共检出wabG、fimH、mrkD、entB和ybtS等5种毒力基因,其中,wabG、entB、fimH和mrkD基因检出率均为100.00％,ybtS基因检出率为21.88％,未检出rmpA和iutA基因;存在2种毒力基因谱型(fimH-mrkD-wabG-entB和fimH-mrkD-wabG-entB-ybtS),二者的区别在于是否携带ybtS基因;虽然ESBLs-KP和non-ESBLs-KP间在毒力基因检出率方面无显著差异(P>0.05),但ESBLs-KP中的ybtS基因检出率高于non-ESBLs-KP.[结论]生牛乳中hmKP存在高毒力和多重耐药风险,是临床KP感染的主要潜在来源,建议居民切勿直接饮用生牛乳,且相关部门应加强对牛乳中hmKP的耐药及毒力监测,兼顾其分布规律,以便对其潜在风险进行精准防御.

关键词：生牛乳、高黏液型肺炎克雷伯菌(hmKP)、超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)、耐药基因、毒力基因、生物被膜

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分类号：S852.61(动物医学（兽医学）)

资助基金：上海市科技兴农重点攻关项目2019-02-08-00-10-F01149

在线出版日期：2022-12-15（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共11页

页码：2654-2664