吉富罗非鱼组蛋白酶B基因克隆及无乳链球菌感染后的表达分析

摘要：

[目的]探究组蛋白酶B基因(CtsB)在吉富罗非鱼感染无乳链球菌前后的表达差异,为深入研究罗非鱼抗无乳链球菌感染的免疫应答机制及后续通过SNP分子标记/基因组编辑技术快速获得吉富罗非鱼抗病新品种提供科学依据.[方法]通过RACE克隆罗非鱼CtsB基因cDNA全长序列,使用SMART、Splign、MEGA v6.0、BoxShade及MegAlign等在线软件进行生物信息学及系统进化分析,并以实时荧光定量PCR检测吉富罗非鱼CtsB基因组织表达谱及无乳链球菌感染后CtsB基因的表达变化规律.[结果]吉富罗非鱼CtsB基因cDNA序列全长1746 bp,包括161 bp的5'端非编码区(5'-UTR)、592 bp的3'端非编码区(3'-UTR)及993 bp的开放阅读框(ORF),共编码331个氨基酸残基.基于CtsB氨基酸序列相似性构建的系统发育进化树显示,吉富罗非鱼与奥利亚罗非鱼的亲缘关系最近,而与鲤鱼、大菱鲆、牙鲆、半滑舌鳎等物种相距较远.CtsB基因在吉富罗非鱼的肝脏、脾脏、鳃、前肾、脑、肠道、皮肤和肌肉等组织中均有表达,且以鳃组织中的相对表达量最高,是其他器官组织的2.0～3.0倍.吉富罗非鱼抗病家系和易感家系感染无乳链球菌后,CtsB基因在脾脏和肾脏中的相对表达量均显著上调(P<0.05),并于感染后50 h达峰值,且抗病家系的上调表达幅度大于易感家系.[结论]CtsB基因在鱼类的进化过程中具有高度保守性,但在不同物种中的表达模式存在明显差异.CtsB基因是吉富罗非鱼的重要免疫因子,在抵御无乳链球菌入侵过程中发挥着重要的免疫作用,可作为罗非鱼抗病育种的SNP分子标记给予开发利用.

关键词：吉富罗非鱼、无乳链球菌、组蛋白酶B基因(CtsB)、表达规律、免疫因子

所属期刊栏目：53

分类号：S965.125(水产养殖技术)

资助基金：广西自然科学基金项目;南宁市科技计划项目;南宁市科技计划项目

在线出版日期：2022-11-11（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：2294-2301