高产胞外多糖海洋芽孢杆菌分离鉴定及其多糖抗肿瘤活性分析

摘要：

[目的]明确广西北部湾海洋细菌胞外多糖(EPS)独特的抗肿瘤等生物学活性,为北部湾海域细菌EPS活性研究及开发利用提供参考依据.[方法]采集广西钦州茅尾海红树林浅层土壤样品,使用LB-苯胺蓝培养基及苯酚—硫酸法筛选EPS高产海洋细菌,基于16S rRNA序列进行菌株鉴定;通过高效凝胶渗透色谱和红外光谱测定EPS的分子量及其结构,最后使用噻唑蓝(MTT)法测定EPS对Vero细胞的毒性及抑制HeLa细胞增殖的效果.[结果]筛选出1株EPS产量为0.2917 mg/mL的菌株,命名为QLc-04,在LB-苯胺蓝固体培养基上生长形成的菌落呈白色,不透明,中央略微隆起,表面粗糙,为革兰氏阳性杆菌.QLc-04与芽孢杆菌属(Bacillus)菌株的16S rRNA序列相似性在99.45％～99.82％,其中与B.thuringiensis BT62(CP044978)的相似度最高(99.82％),与B.cereus ATCC 14579T(AE016877)和B.mycoides DSM 2048T(ACMU01000002)相似性均为99.81％;在基于16S rRNA序列相似性构建的系统发育进化树上,QLc-04与芽孢杆菌属聚类为同一分支,因此确定QLc-04为芽孢杆菌属.QLc-04-EPS分子量约179.9 kD,属于具有吡喃型结构的多糖;QLc-04-EPS对Vero细胞无直接毒性,在10～300μg/mL浓度范围内Vero细胞随QLc-04-EPS浓度的增加其增殖能力不断升高,但QLc-04-EPS浓度超过50μg/mL时对HeLa细胞增殖的抑制作用显著增强(P<0.05).[结论]海洋芽孢杆菌QLc-04经发酵培养36 h其EPS产量为0.2917 mg/mL;QLc-04-EPS为典型吡喃型多糖,分子量为179.9 kD,具有显著抑制HeLa细胞增殖的作用.

关键词：海洋芽孢杆菌;胞外多糖(EPS);吡喃型结构;细胞毒性;抗肿瘤

所属期刊栏目：52

分类号：S917.1(水产基础科学)

资助基金：国家自然科学基金;广西自然科学基金;广西研究生教育创新计划项目

在线出版日期：2022-03-11（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：3166-3173