10.3969/j.issn.2095-1191.2017.10.05
雷公藤ISSR反应体系的建立与优化
[目的]建立适合雷公藤的ISSR-PCR反应体系,为雷公藤种质资源的亲缘关系鉴定和遗传多样性分析提供技术支持.[方法]采用单因素试验设计优化影响雷公藤ISSR-PCR扩增效果的Taq DNA聚合酶、dNTPs、Mg2+、引物浓度和DNA模板含量及退火温度,并以32份雷公藤样品对优化的ISSR-PCR反应体系进行验证.[结果]优化的雷公藤种质资源ISSR-PCR反应体系为:20.00μL反应液中含1.50 U Taq DNA聚合酶、0.30 mmol/L dNTPs、2.00 mmol/L Mg2+、0.40μmol/L引物、20 ng DNA模板和2.00μL 10×Buffer.ISSR-PCR扩增程序中最佳退火温度为54.7℃.[结论]建立优化的雷公藤ISSR-PCR反应体系具有较高的稳定性、重现性和适用性,可应用于雷公藤不同地理种源间的遗传多样性鉴定.
雷公藤、ISSR、反应体系、优化、种质资源鉴定
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S567.1(经济作物)
国家科技支撑计划项目2009BAI73B01;福建省科技创新平台建设项目2008Y2001;中央财政林业科技推广项目闽[2015]TG03号
2017-12-04(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
共6页
1755-1760