兴义维蚋蚋卵（胚胎）原代细胞培养及鉴定

摘要：

【目的】筛选出最适宜兴义维蚋蚋卵（胚胎）原代细胞的培养条件和最佳培养基组合，并对其原代细胞进行鉴定，为蚋类细胞系的建立打下基础。【方法】采用组织块和单细胞法对兴义维蚋蚋卵（胚胎）进行原代细胞培养，分析培养基、温度、pH、CO2和培养器皿对细胞培养的影响；并测定蚋卵（胚胎）及原代细胞的rDNA-ITS区序列，通过构建基于ITS区序列的蚋类系统发育进化树鉴定其种属来源。【结果】兴义维蚋蚋卵（胚胎）原代细胞最适宜的培养方法为组织块法，培养基为改良型Shields and Sang M3，pH 6.0~6.5，培养温度28℃，恒温生化培养箱和5% CO2培养箱对原代细胞培养无明显差异，培养器皿为经多聚赖氨酸（PLL）处理的一次性塑料培养皿/板。由基于ITS区序列构建的蚋类系统发育进化树可知，蚋卵（胚胎）及其原代培养细胞均来源于兴义维蚋。【结论】成功建立的兴义维蚋蚋卵（胚胎）原代细胞培养方法可在科研生产中进一步推广应用。

关键词：兴义维蚋、蚋卵(胚胎)、原代细胞、培养、鉴定

所属期刊栏目：47

分类号：S852.743(动物医学（兽医学）)

资助基金：国家自然科学基金项目30660021；贵州省社会发展科技攻关计划项目黔科合[2012]3100号；贵州省科技计划项目黔科合LH字[2016]7357号；贵州医科大学高等学校大学生创新创业训练计划项目201510660034

在线出版日期：2016-12-27（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：1945-1951