四重PCR检测抗除草剂转基因油菜T45

摘要：

【目的】建立多重PCR检测抗除草剂转基因油菜T45的方法，为其转基因检测提供技术支持。【方法】选择油菜内源参照基因CruA、外源基因P-CaMV 35S、T-CaMV 35S和pat作为四重PCR检测基因，特异性引物序列参照国家相关标准或文献，通过对多重PCR退火温度和引物浓度的优化、灵敏度测试及已知样品验证，建立抗除草剂转基因油菜T45多重PCR检测体系。【结果】多重PCR的适宜退火温度为58℃，适宜引物终浓度（μmol/L）配比CruA∶P-CaMV 35S∶T-CaMV35S∶pat为0.1∶0.2∶0.2∶0.2，方法灵敏度为0.01 ng/μL，所有已知样品的扩增条带与其分子特征显示的外源基因元件完全一致。【结论】建立的抗除草剂转基因油菜T45品系四重PCR检测方法可实现在一个反应体系中同时检测抗除草剂转基因油菜T45内源参照基因和多个外源基因成分，为转基因油菜T45提供了一种有效的检测手段。

关键词：油菜、多重PCR、毛细管电泳、分子检测

所属期刊栏目：47

分类号：S565.4(经济作物)

资助基金：四川省教育厅自然科学基金项目15ZB0331；四川省财政现代农业技术创新与示范专项资金项目2014CXSF-040

在线出版日期：2016-08-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：883-888