甘蔗宿根矮化病病原菌一推测膜蛋白基因(Lxx18460)单克隆抗体的制备和检测

摘要：

[目的]对甘蔗宿根矮化病病原菌(Leifsonia xyli subsp.xyli,Lxx)一推测为抗o'k因子的膜蛋白基因(Lxx18460)进行研究,为今后研究该基因在感病甘蔗体内表达打下基础.[方法]诱导表达并纯化含有推测为抗o'k因子的膜蛋白Lxx1.8460基因的pET-30a质粒菌液,委托南京金斯瑞生物科技有限公司制备单克隆抗体;用Western blotting对细菌及感病和健康甘蔗样品总蛋白进行检测.[结果]Lxx18460基因具有特异性,只存在于甘蔗Lxx中.ELISA单克隆抗体效价大于1∶512000,能够灵敏地检测细菌总蛋白和甘蔗样品蛋白.Western blotting检测结果表明,Lxx18460基因在细菌中和感病甘蔗样品中表达,在健康甘蔗样品中几乎不表达.[结论]Lxx18460基因具有特异性,是Lxx中的抗o'k因子的膜蛋白基因,能够在细菌和感病甘蔗样品体外进行表达.

关键词：甘蔗宿根矮化病、Lxx18460基因、单克隆抗体、ELISA检测、Western blotting检测

所属期刊栏目：47

分类号：Q-331(生物科学的研究方法与技术)

资助基金：国家自然科学基金项目31360293;国家国际科技交流与合作项目2013DFA31600;广西自然科学基金项目2012GXNS-FDA053011

在线出版日期：2016-06-23（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：382-388