水稻种子特异表达启动子Ole18的克隆、序列分析及功能验证

摘要：

[目的]克隆水稻种子特异表达启动子Ole18,为实现外源基因在水稻胚、糊粉层特异表达奠定基础.[方法]采用PCR克隆扬稻6号Ole18启动子序列,并连接至pMD20-T载体上,经PCR验证后进行测序,并对测序结果进行生物信息学分析;用克隆获得的Ole18启动子取代pCAMBIA1301载体中GUS基因上游的CaMV35S启动子构建重组表达载体,经农杆菌介导转化台粳9号,获得转基因植株,对其种子进行GUS染色.[结果]克隆获得大小为1261bp的Ole18启动子序列,与japonica cultivar-group、IR36的18 kD Oleosi基因启动子同源性为99％.启动子预测软件NNPP推测该序列具有启动子的功能,含有种子特异表达启动子所必需的TATA-box、CAAT-box等顺式调控元件.GUS组织化学染色结果表明,该启动子序列能够驱动GUS基因在水稻种子胚及糊粉层中表达.[结论]克隆获得的Ole18启动子具有启动活性,且具有胚及糊粉层特异性表达功能.

关键词：Ole18启动子、基因克隆、序列分析、功能验证

所属期刊栏目：46

分类号：S511(禾谷类作物)

资助基金：国家科技支撑计划项目2013BAD01B05;国家转基因重大专项项目2009ZX08001-032B;福建农林大学青年教师科研基金项目2013xjj06

在线出版日期：2015-11-02（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：1147-1153