LAMP法在水牛早期胚胎性别鉴定中的应用

摘要：

[目的]建立LAMP法快速鉴定水牛早期胚胎性别体系,为预知性别水牛胚胎移植奠定基础.[方法]分别采用化学裂解法和非化学裂解法提取水牛早期胚胎DNA,对比不同方法对G3PDH基因扩增效果的影响;基于水牛SRY基因和12S rRNA基因分别设计雄性特异性引物及雌、雄性共用引物用于LAMP法胚胎性别鉴定,同时以PCR对LAMP法鉴定结果进行验证.[结果]化学裂解法对水牛早期胚胎DNA具有良好的裂解效果,其有效检出率为94.1％.优化的LAMP法对水牛早期胚胎性别鉴定的准确率与检出率均为100.0％,检测灵敏度为2×105 ng.LAMP扩增产物中加入1％ SYBR greenI,于紫外光下观察,阳性呈绿色,阴性呈淡黄色;自然光下观察,阳性呈黄色,阴性呈橙色.以LAMP法对37枚水牛ⅣF早期胚胎性别进行鉴定,其中雄性为28枚,雌性为9枚.PCR验证结果与LAMP法鉴定结果一致.[结论]用化学裂解法提取水牛早期胚胎DNA,再根据水牛SRY基因及12S rRNA基因设计引物进行LAMP法水牛胚胎性别鉴定切实可行.

关键词：水牛、早期胚胎、性别鉴定、LAMP法、化学裂解

所属期刊栏目：46

分类号：S823.83(家畜)

资助基金：广西科学研究与技术开发计划项目桂科攻1123005-3,桂科重14121003-3-2

在线出版日期：2015-10-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：1106-1110