水牛卵母细胞玻璃化冷冻后孤雌激活方法的优化

摘要：

[目的]了解玻璃化冷冻一解冻及不同孤雌激活条件对水牛卵母细胞发育潜能的影响,为构建完善的水牛卵母细胞孤雌激活培养体系奠定基础.[方法]利用玻璃化冷冻法对水牛体外成熟卵母细胞进行冷冻保存1～2d,解冻复苏后进行孤雌激活,以新鲜的体外成熟卵母细胞为对照,探讨离子霉素浓度、6-二甲氨基嘌呤(6-DMAP)浓度和处理时间对玻璃化冷冻复苏后水牛卵母细胞孤雌激活效果的影响.[结果]与新鲜的体外成熟卵母细胞相比,玻璃化冷冻—解冻复苏后水牛体外成熟卵母细胞孤雌激活的卵裂率、4-细胞率、8-细胞率和囊胚发育率均极显著降低(P＜0.01).水牛体外成熟卵母细胞经玻璃化冷冻—解冻复苏后,以3.5 μmol/L离子霉素激活5 min联合2mmol/L 6-DMAP培养2h的孤雌激活效果最佳,其卵裂率、4-细胞率、8-细胞率和囊胚发育率分别为60.6％、45.1％、33.7％和14.8％.[结论]水牛体外成熟卵母细胞经玻璃化冷冻—解冻复苏后,其激活阈值发生改变,因此不宜采用与新鲜体外成熟卵母细胞一致的激活程序进行孤雌激活.

关键词：水牛、卵母细胞、孤雌激活、玻璃化冷冻、离子霉素、6-DMAP

所属期刊栏目：46

分类号：S823.83(家畜)

资助基金：国家现代农业产业技术体系广西创新团队建设项目NYCYTXGXCXTD-04;南宁市科学研究与技术开发计划项目20125191;广西高等学校高水平创新团队及卓越学者计划项目桂教人[2014]7号

在线出版日期：2015-06-19（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：503-507