RT-LAMP可视化检测猪瘟病毒及特异性鉴别猪瘟兔化弱毒疫苗

摘要：

【目的】建立可视化检测猪瘟病毒（CSFV）及特异性鉴别猪瘟兔化弱毒疫苗株（HCLV）的逆转录环介导等温扩增技术（RT-LAMP），为临床检测CSFV野毒株及特异性鉴别HCLV毒株提供技术支持。【方法】根据GenBank中CSFV非结构蛋白NS5B基因的保守序列，设计两套针对CSFV和HCLV的特异性引物，并优化RT-LAMP反应条件，同时用LA-320C浊度仪实时监测其浊度变化。【结果】优化的RT-LAMP仅需在63℃水浴锅中反应50 min即可完成检测，且能通过肉眼观察反应液的颜色变化直接判定结果；所有CSFV样本的检测结果均为阳性（翠绿色），其他非CSFV样本的检测结果均为阴性（桔红色），且能特异性鉴别HCLV毒株，与实时浊度监测结果一致。该方法对CSFV和HCLV的最小检测限分别是100和101 copies，敏感度分别是常规RT-PCR的100倍和10倍。【结论】建立的RT-LAMP特异性强、灵敏度高、方法简便，尤其适合基层进行CSFV感染的快速检测及特异性鉴别HCLV，对有效防控CSF具有重要意义。

关键词：猪瘟病毒(CSFV)、猪瘟兔化弱毒疫苗株(HCLV)、RT-LAMP、浊度、特异性、敏感度

分类号：S852.651(动物医学（兽医学）)

资助基金：国家百千万人才工程人选专项项目945200603；广西科技重大专项项目1222003-2-4；广西特聘专家专项项目2011B020

在线出版日期：2015-04-10（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：338-343