棕榈科植物基因克隆方法的优化

摘要：

[目的]优化棕榈科植物基因克隆方法,为其基因组学研究和分子育种奠定基础.[方法]通过优化DNA提取和目的片段回收步骤,检测其对提取DNA质量和纯度、目的片段回收率与阳性克隆等的影响.[结果]DNA提取方法优化后,提取获得的DNA完整性好,无杂质、无弥散现象,质量较好,其OD260/OD280在1.88～1.93;优化前不同样品提取的DNA仅为40.0～60.0 ng/μL,优化后样品DNA在104.5～214.8 ng/μL,为优化前的2～3倍;目的片段回收方法经优化后,可以从扩增的PCR产物中回收获得条带较清晰的目的片段,其胶回收率较高;对回收的目的片段进行亚克隆,以gyspy74引物鉴定阳性克隆,每个样品的菌落均在700 bp左右扩增获得清晰的目的条带,且其中3个菌落的目的条带测序结果与预期核酸序列一致.[结论]优化后的方法适用于棕榈科植物基因克隆.

关键词：棕榈科植物、基因克隆、优化、胶回收率

所属期刊栏目：45

分类号：S565.9(经济作物)

资助基金：海南省自然科学基金项目312039,314145

在线出版日期：2015-03-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：2123-2128