鸭坦布苏病毒与鸭瘟病毒二重RT-PCR检测方法的建立

摘要：

[目的]建立可同时检测鸭坦布苏病毒(Duck tembusu virus,DTMUV)与鸭瘟病毒(Duck plague virus,DPV)的二重RT-PCR,为有效防控DTMUV与DPV提供技术支撑.[方法]根据GenBank中DTMUVE基因和DPVUL6基因的保守序列,设计合成两对引物,优化反应体系条件,并通过特异性、敏感性试验评价建立的二重RT-PCR.[结果l优化后的二重RT-PCR反应体系为:2×PCR Mix 12.5 μL,其中DTMUV上、下引物各0.5 μL,DPV上、下引物各0.5 μL,混合模板2.0 μL,ddH2O补足至25.0 μL;最佳反应程序:95℃预变性5 min;95℃1 min,54.4℃l min,72℃1 min,进行35个循环;72℃延伸10 min.该方法对DTMUV与DPV的检测敏感性分别达500和600 fg,但对鸭源新城疫病毒、鸭肝炎病毒、番鸭细小病毒、鸭圆环病毒、H9亚型禽流感病毒和减蛋综合症病毒等病原体不敏感.[结论]建立的二重RT-PCR可用于DTMUV与DPV感染的快速鉴别诊断.

关键词：鸭坦布苏病毒、鸭瘟病毒、二重RT-PCR、特异性、敏感性

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分类号：S858.32(动物医学（兽医学）)

资助基金：广西科技攻关重大专项项目1222003-2-4;广西科技攻关项目桂科攻10100014-5;广西特聘专家专项项目2011B020

在线出版日期：2014-04-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：314-317