正交设计优化大旗瓣凤仙ISSR-PCR反应体系

摘要：

[目的]优化大旗瓣凤仙ISSR-PCR反应体系,为大旗瓣凤仙遗传多样性分析提供技术参考.[方法]利用正交试验设计对大旗瓣凤仙ISSR-PCR反应体系的5个因素(Mg2+、dNTP、引物、TaqDNA聚合酶、模板DNA)4水平进行优化分析,并在此基础上对PCR反应过程中的退火温度进行筛选.[结果]建立了大旗瓣凤仙ISSR-PCR的优化反应体系,即在25.0 μL反应体系中含1×PCR Buffer、Mg+ 1.5 mmol/L、dNTP 0.25 mmol/L、引物0.8 μmol/L、TaqDNA聚合酶0.75～1.00 U、模板DNA 100 ng.通过该体系可以筛选出6条对大旗瓣凤仙种群扩增效果较好的引物.[结论]优化的ISSR-PCR反应体系具有较高的稳定性,可用于大旗瓣凤仙及凤仙属植物种群的ISSR遗传多样性分析.

关键词：大旗瓣凤仙、ISSR-PCR、反应体系、优化、正交设计

所属期刊栏目：45

分类号：S682.32;Q948(观赏园艺（花卉和观赏树木）)

资助基金：财政部战略生物资源科技支撑运转专项项目KSCX2-YW-Z-1009

在线出版日期：2014-04-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：184-188