马褂木ISSR-PCR扩增体系的优化

摘要：

[目的]建立稳定的马褂木ISSR-PCR扩增体系,为马褂木种群ISSR多样性分析提供技术支持.[方法]采用单因素试验对ISSR-PCR扩增体系中的MgC12、dNTPs、引物浓度、TaqDNA聚合酶、DNA模板用量和退火温度等主要因素进行筛选优化.[结果]采用试剂盒方法提取马褂木叶片DNA的效果优于改良CTAB法,最优PCR反应体系为:总体积20.0 μL中含有l0x Buffer 2.0 μL、MgC12 1.8 mmol/L、dNTPs 0.2 mmol/L、引物0.5 μmol/L、Taq DNA聚合酶1.00 U、DNA模板60 ng、退火温度59.1℃.[结论]优化后的马褂木ISSR-PCR扩增体系能够扩增获得清晰、稳定的条带,可满足马褂木种群ISSR多样性分析的要求.

关键词：马褂木、ISSR、扩增体系、优化

所属期刊栏目：44

分类号：S792.21(森林树种)

资助基金：广西科技攻关项目桂科攻10100012-2;广西"十一五"林业科技项目林科字2009[16]

在线出版日期：2013-09-26（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：1087-1091