广西巴马小型猪ApoE基因真核表达载体的构建及鉴定

摘要：

[目的]构建广西巴马小型猪载脂蛋白E基因(ApoE)真核表达载体,为生产转ApoE基因的广西巴马小型猪奠定基础.[方法]采用RT-PCR从广西巴马小型猪肝组织中扩增出ApoE基因编码序列,将该基因连接至pEGFP-C1载体上,利用双酶切和测序对重组质粒pEGFP-C 1-ApoE进行鉴定,并将重组质粒pEGFP-C1-ApoE转染PK15细胞.[结果]广西巴马小型猪ApoE基因编码区序列长954 bp,编码317个氨基酸,与GenBank已公布的猪ApoE基因cDNA序列(NM_214308)对应区段同源性为100％.构建的重组质粒pEGFP-C1-ApoE转染PK15细胞48 h后,在荧光显微镜下转染细胞发出荧光,细胞形态清晰,可见细胞核.[结论]广西巴马小型猪ApoE基因能与pEGFP-C1载体重组构建pEGFP-C1-ApoE真核表达载体,有效表达出ApoE蛋白.

关键词：广西巴马小型猪、载脂蛋白E基因、pEGFP-C1载体、重组质粒、真核表达载体

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分类号：S828.99;Q786(家畜)

资助基金：国家自然科学基金项目31060293;广西科技基础条件平台建设项目09-090-09

在线出版日期：2013-09-16（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：1022-1025