翅碱蓬脱水素基因克隆及表达载体构建

摘要：

[目的]克隆翅碱蓬脱水素蛋白基因并构建其植物表达载体,为其耐盐性研究奠定基础.[方法]提取翅碱蓬总RNA,通过同源克隆和RACE方法分离获得翅碱蓬脱水素蛋白基因,并构建该基因的植物表达载体pBI121-DHN.[结果]克隆获得翅碱蓬脱水素蛋白基因的全长cDNA为847 bp(GenBank序列编号:KC013239),命名为SsDHN.序列分析结果表明,SsDHN全长cDNA中5’-UTR为61 bp,ORF为678 bp,3’-UTR为108 bp且包含29 bp的poly(A)尾巴,其起始密码子ATG位于62 bp处,终止密码子TAA位于737 bp处,编码225个氨基酸.氨基酸比对结果表明,该基因推导的氨基酸与已知其他植物DHN基因序列有35％～48％的相似性.聚类分析结果显示,翅碱蓬(SsDHN)与拟南芥和荠菜DH亲缘关系较近,与咖啡、杜鹃花的亲缘关系较远.[结论]成功克隆了翅碱蓬脱水素基因,并构建了其表达载体,可用于翅碱蓬抗盐的遗传改良.

关键词：盐地碱蓬、脱水素蛋白、基因克隆、表达载体构建

所属期刊栏目：44

分类号：S567;Q943.2(经济作物)

资助基金：辽宁省农业生物技术重点实验室基金项目200556;辽宁省农业科学院博士后基金项目2012

在线出版日期：2013-09-16（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：893-897