H5亚型禽流感病毒RT-LAMP可视化检测技术的建立

摘要：

[目的]建立一种适用于H5亚型禽流感病毒(AIV)的逆转录环介导等温扩增(RT-LAMP)可视化快速检测技术,为控制疫情扩散、减少经济损失争取了时间.[方法]根据GenBank中H5亚型AIV血凝素(HA)基因序列,设计一套针对HA基因6个区域的4条特异性引物,在反应之前向反应液中加入荧光试剂(Calcein/MnCl2混合液),然后对反应条件和体系进行优化.[结果]优化的RT-LAMP技术操作简便迅速,常规水浴锅中50 min可完成,能特异性地检测出H5亚型AIV,但对其他HA亚型AIV、禽呼吸道病原体无交叉扩增反应,灵敏度是常规RT-PCR的10倍；反应结束后无需打开反应管盖,即可根据反应液的颜色变化对结果进行判定.[结论]建立的H5亚型AIV RT-LAMP可视化检测技术具有简便、快速、特异等特点,可在设备有限的基层兽医站及养殖场对H5亚型AIV进行快速初步诊断.

关键词：H5亚型禽流感病毒、RT-LAMP、可视化检测、血凝素(HA)基因、荧光试剂

所属期刊栏目：44

分类号：S858.31(动物医学（兽医学）)

资助基金：广西科技攻关项目桂科攻1222003-2-4;广西特聘专家专项项目20118020;广西自然科学基金项目2011GXNS-FA018088;广西基本科研业务费专项项目桂兽研专项09-2

在线出版日期：2013-08-27（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：323-327