益生菌制品中植物乳杆菌ST-Ⅲ快速定性、定量检测方法的建立

摘要：

[目的]建立快速定性、定量检测益生菌产品中植物乳杆菌菌株ST-Ⅲ的方法,为其实际应用提供参考.[方法]根据植物乳杆菌菌株ST-Ⅲ与NCBI库中3株已知序列的植物乳杆菌全基因组序列差异,设计菌株特异性引物,进行菌株特异性PCR验证和定性检测;然后建立荧光定量PCR,并检测益生菌制品中菌株ST-Ⅲ含量.[结果]设计的引物具有良好的菌株特异性;经PCR扩增,含有ST-Ⅲ的检验样本出现预期特征条带,与预期目的片段(242 bp)相近.建立的荧光定量PCR标准曲线方程为y=-3.3691gx+39.84,R2为0.9990,符合Real-time PCR定量的要求,其检测限为2.85×l03CFU/mL.经检测,样品中植物乳杆菌ST-Ⅲ的数量分别为3.25×105、1.28×106、4.55X106 CFU/mL.[结论]建立的植物乳杆菌菌株ST-Ⅲ定性、定量检测方法快速灵敏、测定时间短,可以在实际生产中应用.

关键词：益生菌、植物乳杆菌ST-Ⅲ、PCR、Real-time PCR、定性定量检测

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分类号：TS252.7(食品工业)

资助基金：科技部"十二五"科技支撑计划项目2012BAD28B08;科技部"973"计划项目2012CB723706;科技部农业成果转化项目2010GB2C000143

在线出版日期：2013-01-14（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：1443-1446