10.3969/j:issn.2095-1191.2012.09.1262
高山离子芥冷诱导基因转化甘蔗二元植物表达载体构建
[目的]利用载体重组技术分别将高山离子芥冷诱导基因(Cbcor15a)和报告基因eGF插入载体pCambia1300-bar,并引入玉米泛素基因启动子UBi-1代替载体本身启动子CaMV 35s,重组为适合甘蔗转基因的二元植物表达载体pCambia 1300-cbcor 15a-bar.[方法]参照pCambia1300-bar载体多克隆位点和基因Cbcor15a、eGFP和启动子UBi-1的核苷酸序列设计引物,通过载体重组技术将基因和启动子分别插入相应的位点.利用基因枪分别将pCambia1300-bar载体和重组载体导入洋葱表皮细胞,用荧光显微镜和激光共聚焦显微镜观察.[结果]与导入pCambia 1300-bar载体的洋葱表皮细胞相比较,导入重组载体pCambia1300-cbcor15a-bar的洋葱表皮细胞内有强烈的绿色荧光信号.[结论]重组甘蔗转基因二元植物表达载体启动子Ubi-1能够调控下游冷诱导基因Cbcor15a和报告基因eGFP的正常高效表达,为外源基因Cbcor15a转化甘蔗提供保障.
Cbcor15a、甘蔗、转基因、植物表达载体构建、瞬时表达
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Q943.2(植物学)
广西科学基金项目桂科自0990182,桂科基0778006-4,桂科青0832059,2011GXNSFF018002,2011GXNSFD018021;广西农业科学院博士后基金项目桂农科博2009013;广西农业科学院基本科研业务专项项目201107Z基,G2010003,G2010003;广西农业科学院公益性维持项目桂农科2012GW13;南宁市科学研究与技术开发计划项目201102026B
2013-01-28(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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