安氏隐孢子虫ITS-1基因PCR检测方法的建立

摘要：

[目的]建立针对安氏隐孢子虫的PCR快速检测方法,为安氏隐孢子虫的检测和分子流行病学调查提供技术支撑.[方法]根据GenBank中安氏隐孢子虫的ITS-1基因序列设计1对特异性引物,建立基于ITS-1基因的PCR方法,并通过特异性试验、敏感性试验、临床检测以及与经典巢式PCR检测方法进行比较等,验证其可行性.[结果]基于ITS-1基因的PCR检测方法能扩增出安氏隐孢子虫的特异条带,而对猪源隐孢子虫、贝氏隐孢子虫、微小隐孢子虫、牛泰勒氏虫、牛巴贝斯虫、伊氏锥虫、食道口线虫的扩增结果均为阴性；将测序结果进行BLAST比对,发现其与GenBank中安氏隐孢子虫的同源性均在99％以上.敏感性最低可检测每克牛粪中5个卵囊；用于检测广西不同地区的1613份牛粪样品时,与经典巢式PCR检测方法相比,发现两者的阳性检出率均为11.72％,且吻合率达100％.[结论]安氏隐孢子虫ITS-i基因PCR检测方法具有快速、敏感、特异的特点,适用于安氏隐孢子虫的检测和分子流行病学调查分析.

关键词：安氏隐孢子虫、ITS-1基因、PCR检测、巢式PCR

所属期刊栏目：43

分类号：S852.723(动物医学（兽医学）)

资助基金：公益性行业农业科研专项项目201103008;广西科研基本业务费专项项目桂科专项12-2;广西水产畜牧兽医局资助项目桂渔牧财[2011]52号

在线出版日期：2012-10-29（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：701-704