猪脑心肌炎病毒一步法RT-PCR检测方法的建立及应用

摘要：

[目的]实现快速、准确地对猪脑心肌炎进行临床诊断和病原学检测.[方法]根据GenBank中已发表的猪脑心肌炎病毒(EMCV)3D基因序列设计合成1对特异性引物,优化反应条件,建立了EMCV一步法RT-PCR检测方法,并对该方法的特异性、敏感性和重复性进行验证.[结果]一步法RT-PCR可以从EMCV BJC3株中扩增出与试验设计相符的286 bp特异性片段,而对猪口蹄疫病毒(FMDV)、猪瘟病毒(CSFV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪伪狂犬病病毒(PRV)、猪细小病毒(PPV)、BHK-21正常细胞的扩增结果均为阴性;对EMCV BJC3株细胞毒的敏感度达到2 TCID50;对10份EMCV BJC3株细胞毒进行重复性检测,结果均一致;对207份临床疑似发病猪的病料进行检测,其阳性检出率为9.18%.[结论]所建立的EMCV一步法RT-PCR检测方法具有特异、灵敏、高效、快速等特点,可用于EMCV的临床检测及流行病学调查.

关键词：猪、脑心肌炎病毒(EMCV)、3D基因、一步法RT-PCR

所属期刊栏目：42

分类号：S858.28(动物医学（兽医学）)

资助基金：广西青年科学基金项目桂科青0728047;广西科技创新能力与条件建设基金项目08-05-01D

在线出版日期：2011-08-11（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：324-327