火炬松SSR-PCR反应体系的建立及引物筛选

摘要：

以火炬松(Pinus teada)幼嫩针叶为材料,采用单因素试验设计分析各组分对SSR-PCR扩增结果的影响,并进一步应用正交试验设计,从DNA模板、引物、dNTPs、Mg2和Taq酶5个因素3个水平对SSR扩增效果进行研究,确定火炬松SSR-PCR的最佳反应体系.结果表明:各因素不同水平浓度对SSR-PCR反应结果均有影响,火炬松SSR-PCR优化后的反应体系为:DNA模板80 ng、引物0.3μmol/L、dNTPs 0.20 mmol/L、Mg2+2.0 mmol/L、Taq酶1.00U、1×PCR Buffer,总体积25μL.运用该体系从60对引物中筛选出扩增条带清晰、多态性丰富的SSR引物8对,并用不同火炬松家系进行了检验,证明该体系稳定可靠.

关键词：火炬松、SSR-PCR、单因素试验、正交设计、引物筛选

所属期刊栏目：45

分类号：S791.255(森林树种)

资助基金：引进国际先进林业科学技术项目2013-4-32;湖南省研究生科研创新项目CX2016B329;中南林业科技大学研究生科技创新基金资助项目CX2016B17

在线出版日期：2016-12-20（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：253-258