西红花苷抑制NFATc3活性促进与肿瘤成纤维细胞共培养的结直肠癌细胞放射敏感性

摘要：

目的 探究西红花苷对与肿瘤成纤维细胞(CAFs)共培养的结直肠癌细胞放射敏感性的影响,并探究分子机制.方法 通过实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)和蛋白质免疫印记(Western blotting)比较人正常结肠上皮细胞NCM460和结直肠癌细胞系SW480、SW620、HCT116、LOVO中活化T细胞核因子c3(NFATc3)表达差异.建立CAFs与HCT116细胞共培养体系,西红花苷处理细胞后经不同剂量(0、2、4、6、8 Gy)X射线照射,细胞克隆形成实验分析细胞存活分数(SF).再将HCT116 细胞分为对照组、6 Gy组、CAFs/HCT116+6 Gy组、CAFs/HCT116+西红花苷+6 Gy组,进行对应处理后,MTT法检测各处理组HCT116 细胞活性,流式细胞术检测各处理组HCT116 细胞凋亡率,Hoechst 33258 染色观察各处理组HCT116 细胞凋亡形态,qRT-PCR和Western blotting测定各处理组HCT116 细胞中NFATc3 表达水平.结果 相较于人正常结肠上皮细胞NCM460,人结直肠癌细胞系SW480、SW620、HCT116、LOVO中的NFATc3 mRNA和蛋白相对表达量均显著上调(P＜0.05).与HCT116 细胞比较,与CAFs共培养的HCT116 细胞经辐射后的SF显著增高(P＜0.05);与CAFs共培养的HCT116 细胞比较,与CAFs共培养的HCT116 细胞经西红花苷处理再进行辐射的SF显著降低(P＜0.05).与 6 Gy组比较,CAFs/HCT116+6 Gy组HCT116 细胞存活率显著升高(P＜0.05),细胞凋亡率显著下降(P＜0.05),细胞内染色也较为均匀,未见致密浓染的凋亡状细胞,细胞中 NFATc3 mRNA 和蛋白相对表达量均显著上调(P＜0.05);而与CAFs/HCT116+6 Gy组比较,CAFs/HCT116+西红花苷+6 Gy组HCT116 细胞存活率显著降低(P＜0.05),细胞凋亡率显著升高(P＜0.05),细胞中有较多致密浓染、碎裂荧光块,同时,细胞中NFATc3 mRNA和蛋白相对表达量显著下调(P＜0.05).结论 西红花苷能够明显提高与CAFs共培养的结直肠癌HCT116 细胞的放射敏感性,从而促进细胞发生凋亡,该作用可能与抑制NFATc3 有关.

关键词：结直肠癌、肿瘤成纤维细胞、西红花苷、放射敏感性、活化T细胞核因子c3

所属期刊栏目：38

分类号：R285(中药学)

资助基金：新疆维吾尔自治区自然科学基金资助项目2022D01C302

在线出版日期：2023-10-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：2381-2388