绿原酸通过抑制PI3K-Akt信号通路诱导肺癌A549细胞线粒体功能障碍

摘要：

目的:探讨绿原酸能否通过作用于PI3K-Akt信号通路造成线粒体功能障碍，从而抑制肺癌A549细胞增殖、迁移、侵袭和促进其凋亡。方法:采用梯度浓度（0、25、50、100、150、200 μg/ml）的绿原酸干预A549细胞48 h，CCK-8实验检测细胞增殖率并计算半抑制浓度（IC
50）。将A549细胞分成空白组、绿原酸组（IC
50）和绿原酸+740YP组（IC
50绿原酸+50 μg/ml 740YP），干预48 h后使用细胞划痕实验检测细胞迁移距离，细胞侵袭实验检测细胞侵袭能力，流式细胞术检测细胞周期、细胞凋亡水平与线粒体膜电位变化情况，酶联免疫吸附试验检测细胞上清丙二醛（MDA）含量，蛋白质印迹法检测细胞中p-PI3K、p-Akt和Caspase3蛋白表达情况。
结果:绿原酸对A549细胞的IC
50为57.45 μg/ml。细胞划痕实验结果显示，空白组、绿原酸组和绿原酸+740YP组细胞48 h迁移距离分别为（424.80±14.43）、（289.67±18.93）和（402.22±17.99）μm，细胞侵袭实验结果显示，3组细胞48 h侵袭细胞数量分别为（96.00±6.24）、（35.33±7.64）和（83.00±2.00）个，流式细胞术结果显示，3组细胞48 h凋亡率分别为（6.15±0.17）%、（54.63±0.72）%和（17.27±0.39）%，差异均具有统计学意义（
F=105.98，
P<0.001；
F=90.62，
P<0.001；
F=8 321.99，
P<0.001）；与空白组相比，绿原酸组和绿原酸+740YP组细胞迁移距离和侵袭数量均减少（均
P<0.05），细胞凋亡率显著升高（均
P<0.001）；与绿原酸组相比，绿原酸+740YP组细胞迁移距离增加（
P<0.001），细胞侵袭数量增多（
P<0.001），细胞凋亡率降低（
P<0.001）。流式细胞术结果显示，空白组、绿原酸组和绿原酸+740YP组细胞G
0/G
1期比例分别为（65.75±0.58）%、（55.84±0.78）%和（55.24±1.37）%，G
2/M期比例分别为（11.21±1.03）%、（20.23±0.62）%和（9.96±0.33）%，S期比例分别为（23.04±0.49）%、（23.92±1.36）%和（34.80±1.15）%，差异均具有统计学意义（
F=111.02，
P<0.001；
F=181.26，
P<0.001；
F=113.05，
P<0.001）；与空白组相比，绿原酸组和绿原酸+740YP组细胞G
0/G
1期比例减少（均
P<0.001），绿原酸组G
2/M期比例增加（
P<0.001），绿原酸+740YP组细胞S期比例增加（
P<0.001）；与绿原酸组相比，绿原酸+740YP组细胞G
2/M期比例减少、S期比例增加（均
P<0.001）。线粒体膜电位检测结果显示，空白组、绿原酸组和绿原酸+740YP组线粒体JC-1荧光强度分别为39.51±1.32、10.05±0.19和21.85±1.45，差异具有统计学意义（
F=508.82，
P<0.001）；与空白组相比，绿原酸组和绿原酸+740YP组荧光强度均降低（均
P<0.001）；与绿原酸组相比，绿原酸+740YP组荧光强度升高（
P<0.001）。酶联免疫吸附试验结果显示，空白组、绿原酸组和绿原酸+740YP组细胞MDA含量分别为（0.47±0.01）、（0.61±0.01）和（0.56±0.01）nmol/ml，差异具有统计学意义（
F=162.30，
P<0.001）；与空白组相比，绿原酸组和绿原酸+740YP组细胞MDA含量均增加（均
P<0.001）；与绿原酸组相比，绿原酸+740YP组细胞MDA含量减少（
P=0.001）。蛋白质印迹法结果显示，空白组、绿原酸组和绿原酸+740YP组细胞p-PI3K蛋白相对表达水平分别为1.01±0.33、0.28±0.14和0.34±0.20，p-Akt蛋白相对表达水平分别为1.00±0.16、0.43±0.05和0.95±0.14，Caspase3蛋白相对表达水平分别为1.00±0.04、1.41±0.05和0.70±0.13，差异均具有统计学意义（
F=8.48，
P=0.018；
F=19.11，
P=0.002；
F=57.50，
P<0.001）；与空白组相比，绿原酸组细胞p-PI3K、p-Akt蛋白表达均降低、Caspase3蛋白表达升高（均
P<0.05），绿原酸+740YP组p-PI3K、Caspase3蛋白表达均降低（均
P<0.05）；与绿原酸组相比，绿原酸+740YP组细胞p-Akt蛋白表达升高、Caspase3蛋白表达降低（均
P<0.05）。
结论:绿原酸可能通过减少PI3K与Akt蛋白磷酸化抑制PI3K-Akt信号通路，造成线粒体功能受损，引起MDA累积，最终导致肺癌A549细胞功能受损与活性降低，促进细胞凋亡。

关键词：癌，非小细胞肺、绿原酸、磷酸肌醇3-激酶类、细胞凋亡、线粒体

所属期刊栏目：51

在线出版日期：2024-01-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：21-28