10.3760/cma.j.cn371439-20230523-00099
脱水淫羊藿素对肝癌细胞增殖、迁移和凋亡的影响
目的:研究异戊烯基类黄酮化合物脱水淫羊藿素(AHI)对人肝癌细胞株MHCC-97H的增殖、迁移和凋亡的影响。方法:体外培养人肝癌细胞株MHCC-97H及人正常肝细胞株L02,分别用0、20、40、80、120、160、200 μg/ml浓度的AHI处理MHCC-97H细胞,用0、25、50、100、150、200、400、500 μg/ml浓度的AHI处理L02细胞。采用CCK-8和克隆形成实验检测细胞增殖情况;划痕实验检测细胞迁移情况;Hoechst33342实验和流式细胞术检测细胞凋亡情况;蛋白质印迹法检测细胞凋亡相关蛋白表达情况。结果:经0、20、40、80、120、160、200 μg/ml AHI处理24 h后,MHCC-97H细胞的存活率分别为(100.00±0.00)%、(97.41±2.10)%、(96.58±3.23)%、(87.72±4.85)%、(78.33±3.76)%、(56.97±2.61)%、(15.25±2.51)%,差异有统计学意义(
F=429.20,
P<0.001);80、120、160、200 μg/ml AHI与0 μg/ml AHI相比,差异均有统计学意义(均
P<0.001)。经0、25、50、100、150、200、400、500 μg/ml AHI处理24 h后,L02细胞存活率分别为(100.00±0.00)%、(96.82±3.79)%、(95.36±3.43)%、(90.79±5.75)%、(77.67±5.66)%、(63.98±5.22)%、(34.22±4.01)%、(33.84±4.41)%,差异有统计学意义(
F=233.20,
P<0.001);100、150、200、400、500 μg/ml AHI与0 μg/ml AHI相比,差异均有统计学意义(均
P<0.05)。AHI处理L02细胞24 h半抑制浓度(IC
50)为(300.20±17.10) μg/ml,明显大于MHCC-97H细胞IC
50(158.60±5.50) μg/ml,差异有统计学意义(
t=13.65,
P<0.001)。经0、120、160、200 μg/ml AHI处理24 h后,MHCC-97H细胞克隆数分别为1 993.00±46.29、1 355.00±54.84、998.33±21.03、218.33±35.95,差异有统计学意义(
F=954.80,
P<0.001);120、160、200 μg/ml AHI与0 μg/ml AHI相比,差异均有统计学意义(均
P<0.001)。经0、120、160、200 μg/ml AHI处理24 h后,MHCC-97H细胞愈合率分别为(51.68±1.93)%、(16.04±0.73)%、(8.88±0.31)%、(-6.94±0.46)%,差异有统计学意义(
F=1 616.00,
P<0.001);120、160、200 μg/ml AHI与0 μg/ml AHI相比,差异均有统计学意义(均
P<0.001)。Hoechst33342实验显示,经0 μg/ml AHI处理的MHCC-97H细胞于倒置显微镜下显示出均匀的暗蓝色,并呈现出完整的细胞核状态;相较于0 μg/ml,120、160、200 μg/ml AHI处理的细胞出现皱缩、破碎的现象,细胞核形态异常,部分细胞核被染为亮蓝色,且该情况随着浓度的增加愈为明显。经0、120、160、200 μg/ml AHI处理24 h后,MHCC-97H细胞凋亡率分别为(10.51±0.56)%、(42.23±0.87)%、(61.92±0.52)%、(72.05±0.74)%,差异有统计学意义(
F=4 677.00,
P<0.001);120、160、200 μg/ml AHI与0 μg/ml AHI相比,差异均有统计学意义(均
P<0.001)。经0、120、160、200 μg/ml AHI处理的MHCC-97H细胞Bax、Cleaved Caspase-3/Caspase-3、Cleaved Caspase-9/Caspase-9、Bcl-2蛋白相对表达量差异均有统计学意义(
F=30.43,
P<0.001;
F=212.80,
P<0.001;
F=475.30,
P<0.001;
F=10.75,
P=0.004);160、200 μg/ml AHI Bax蛋白表达与0 μg/ml AHI相比,均显著升高(均
P<0.001);120、160、200 μg/ml AHI Cleaved Caspase-3/Caspase-3、Cleaved Caspase-9/Caspase-9蛋白表达与0 μg/ml AHI相比,均显著升高(均
P<0.001);120、160、200 μg/ml AHI Bcl-2蛋白表达与0 μg/ml AHI相比,均显著降低(均
P<0.05)。
结论:AHI可抑制人肝癌细胞株MHCC-97H的增殖、迁移,并促进其凋亡。
肝肿瘤、细胞增殖、细胞运动、细胞凋亡、脱水淫羊藿素
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2024-01-30(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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