Bcl-2 BH4选择性抑制剂BDA-366抑制NK/T细胞淋巴瘤细胞的机制研究

摘要：

目的:研究Bcl-2 BH4选择性抑制剂BDA-366对NK/T细胞淋巴瘤（NK/TCL）的抑制作用和杀伤机制。方法:用0、0.05、0.10、0.20、0.30、0.40、0.50 μmol/L的BDA-366处理人NK白血病细胞株YT和人NK/TCL细胞株NK92，使用CCK-8法计算BDA-366对细胞的半抑制浓度（IC
50）值；流式细胞术检测对照组和IC
50浓度BDA-366处理组细胞凋亡水平；蛋白质印迹法检测对照组、1/2 IC
50、IC
50、2倍IC
50浓度BDA-366处理组细胞凋亡相关蛋白表达水平；TMRE和Fluo-3荧光探针法检测对照组和IC
50浓度BDA-366处理组细胞线粒体膜电位，以及对照组、IC
50、2倍IC
50浓度BDA-366处理组细胞内Ca
2+浓度；对对照组和10 mg/kg BDA-366腹腔注射组NOD-SCID小鼠进行称重和小鼠组织HE染色，以评估BDA-366是否具有体内毒性。
结果:BDA-366对于YT和NK92细胞株的IC
50分别为0.065、0.086 μmol/L。流式细胞术结果显示，对照组和0.065 μmol/L BDA-366组YT细胞凋亡率分别为（6.62±1.59）%、（34.60±3.06）%，对照组和0.086 μmol/L BDA-366组NK92细胞凋亡率分别为（5.57±0.88）%、（29.18±0.90）%，差异均具有统计学意义（
t=14.05，
P<0.001；
t=32.58，
P<0.001）。对照组、0.043、0.086、0.172 μmol/L BDA-366组NK92细胞Bax相对表达量分别为0.85±0.00、1.26±0.04、1.51±0.18、1.15±0.10（
F=20.70，
P<0.001），各BDA-366处理组Bax相对表达量均高于对照组（均
P<0.05）。对照组和0.065 μmol/L BDA-366组YT细胞TMRE荧光强度分别为8 372.00±330.47、6 419.67±311.34，对照组和0.086 μmol/L BDA-366组NK92细胞TMRE荧光强度分别为9 169.00±535.72、7 311.67±295.52，差异均具有统计学意义（
t=7.45，
P=0.002；
t=5.26，
P=0.006）。在YT细胞中，0.065、0.130 μmol/L BDA-366组细胞内Ca
2+浓度均高于对照组（5 791.67±220.45、6 729.33±585.39、4 874.67±112.61，
F=19.16，
P=0.003）（
P=0.039；
P=0.002）；在NK92细胞中，0.086、0.172 μmol/L BDA-366组细胞内Ca
2+浓度均高于对照组（4 553.67±17.62、4 740.33±254.50、4 185.67±17.67，
F=10.96，
P=0.010）（
P=0.039；
P=0.007）。BDA-366组和对照组小鼠第12天相对于第0天体重变化差异无统计学意义[（3.18±0.01）g比（2.73±0.58）g，
t=0.60，
P=0.570]，HE染色结果未见BDA-366组小鼠心、肝、脾、肺、肾形态异常。
结论:BDA-366在体外可促进NK/TCL细胞发生凋亡，在体内不引起小鼠体重减轻和器官HE染色形态改变。BDA-366对NK/TCL细胞的抑制作用可能是通过提高Bax表达、诱导Ca
2+释放和降低线粒体膜电位实现的。

关键词：原癌基因蛋白质c-bcl-2、细胞凋亡、NK/T细胞淋巴瘤

所属期刊栏目：50

资助基金：国家自然科学基金82170191;National Natural Science Foundation of China82170191

在线出版日期：2024-01-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：413-418