SAMHD1抑制肺腺癌细胞中PD-L1表达的研究

摘要：

目的:探讨在肺腺癌中含SAM域和HD域蛋白1（SAMHD1）与程序性死亡配体-1（PD-L1）表达的相关性。方法:通过在线数据库GEPIA和Kaplan-Meier Plotter分析SAMHD1在肺腺癌中的表达及对预后的影响。通过实时荧光定量PCR（qPCR）和蛋白质印迹法检测SAMHD1在多个肺腺癌细胞株中的表达。利用小干扰RNA转染及慢病毒感染技术分别对H1975、H1299及LLC细胞进行SAMHD1基因沉默，通过qPCR、蛋白质印迹法检测对照组、siSAMHD1-1组和siSAMHD1-2组肺腺癌细胞中PD-L1 mRNA及蛋白表达水平，用流式细胞术检测细胞膜PD-L1的表达水平。构建小鼠肺腺癌移植瘤模型，用免疫组织化学法检测对照组和shSAMHD1组移植瘤组织中PD-L1的表达。用CCK-8检测对照组、siSAMHD1-1组和siSAMHD1-2组肺腺癌细胞增殖活力。结果:GEPIA数据库结果表明，SAMHD1 mRNA在肺腺癌中的表达较肺正常组织低（4.81±0.90
vs. 5.99±0.76，
t=20.67，
P<0.001）。SAMHD1高表达患者中位总生存期明显长于低表达患者（109.0个月
vs. 87.7个月，
χ2=26.83，
P=0.002）。A549、PC9、H1299和H1975细胞中SAMHD1 mRNA相对表达量分别为1.00±0.02、0.75±0.05、3.49±0.19和7.25±0.38（
F=589.00，
P<0.001），蛋白相对表达量分别为1.00±0.06、0.34±0.07、1.67±0.22和2.11±0.63（
F=15.79，
P=0.001）。H1975细胞中，对照组、siSAMHD1-1组和siSAMHD1-2组的PD-L1 mRNA相对表达水平分别为1.00±0.00、1.54±0.26、2.89±0.13（
F=102.30，
P<0.001），蛋白相对表达水平分别为1.00±0.01、1.50±0.10和1.52±0.33（
F=6.65，
P=0.030）；H1299细胞中，3组的PD-L1 mRNA相对表达水平分别为1.00±0.08、1.63±0.03和2.14±0.03（
F=368.80，
P<0.001），蛋白相对表达水平分别为1.00±0.07、1.88±0.35和2.05±0.38（
F=10.66，
P=0.011），siSAMHD1-1组和siSAMHD1-2组PD-L1表达水平均高于对照组（均
P<0.05）。流式细胞术结果表明，H1975细胞中，对照组、siSAMHD1-1组和siSAMHD1-2组膜PD-L1荧光强度分别为246.83±27.59、325.60±8.00和308.93±7.60（
F=17.56，
P=0.003）；H1299细胞中，3组的荧光强度分别为959.00±6.25、1 084.33±7.64和1 085.33±21.22（
F=86.74，
P<0.001），siSAMHD1-1组和siSAMHD1-2组荧光强度均高于对照组（均
P<0.05）。在小鼠移植瘤模型中，shSAMHD1组PD-L1的H-SCORE评分高于对照组（7.99±1.10
vs. 4.49±0.43，
t=5.13，
P=0.007）。H1975细胞中，对照组、siSAMHD1-1组和siSAMHD1-2组72 h细胞增殖活力分别为0.50±0.02、0.75±0.05和0.73±0.06（
F=25.01，
P=0.001）；H1299细胞中，3组72 h细胞增殖活力分别为0.80±0.01、1.00±0.04和0.93±0.07（
F=13.90，
P=0.006），siSAMHD1-1组和siSAMHD1-2组细胞增殖活力均高于对照组（均
P<0.05）。
结论:在肺腺癌中，沉默SAMHD1可以提高PD-L1的表达。

关键词：肺腺癌、B7-H1抗原、含SAM域和HD域蛋白1

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资助基金：国家自然科学基金81972852;National Natural Science Foundation of China81972852

在线出版日期：2023-05-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：658-664