金松双黄酮联合CX-4945通过Notch1通路调控胶质母细胞瘤细胞增殖与凋亡的机制研究

摘要：

目的:探究金松双黄酮联合CK2抑制剂CX-4945对脑胶质母细胞瘤U87细胞增殖与凋亡的影响及作用机制。方法:体外培养脑胶质母细胞瘤U87细胞，分别用0.01、0.10、1.00、10.00、100.00 μmol/L浓度的金松双黄酮处理U87细胞；用1.25、2.50、5.00、10.00、20.00 μmol/L浓度的CX-4945处理U87细胞。将U87细胞分为对照组（不做任何处理）、金松双黄酮组（100.00 μmol/L金松双黄酮）、CX-4945组（5.00 μmol/L CX-4945）、金松双黄酮联合CX-4945组（100.00 μmol/L金松双黄酮+5.00 μmol/L CX-4945）。采用MTT法检测细胞存活率；Caspase3/7活力检测法和Annexin Ⅴ/ PI双染法检测细胞凋亡情况；蛋白质印迹法检测100.00 μmol/L金松双黄酮处理U87细胞后Notch1通路相关蛋白ICN1、HES1和DLL3表达情况。结果:0、0.01、0.10、1.00、10.00、100.00 μmol/L浓度的金松双黄酮处理U87细胞存活率分别为（100.00±6.30）%、（112.02±7.63）%、（140.84±6.73）%、（113.92±7.92）%、（102.60±7.12）%、（73.16±2.74）%，差异具有统计学意义（
F=55.21，
P<0.001）；0 μmol/L与0.01、0.10、1.00、100.00 μmol/L浓度时的细胞存活率差异均具有统计学意义（
P=0.009；
P<0.001；
P=0.003；
P<0.001）。100.00 μmol/L浓度时的金松双黄酮可抑制U87细胞活性，而其他浓度则表现为U87细胞活性的增强或无明显作用。0、1.25、2.50、5.00、10.00、20.00 μmol/L浓度的CX-4945处理U87细胞存活率分别为（100.00±5.53）%、（108.70±10.24）%、（93.14±2.82）%、（81.46±4.92）%、（56.92±3.99）%、（31.24±2.67）%，差异具有统计学意义（
F=135.18，
P<0.001）；0 μmol/L与1.25、5.00、10.00、20.00 μmol/L浓度时的差异均具有统计学意义（
P=0.022；
P<0.001；
P<0.001；
P<0.001）。低浓度（1.25 μmol/L）的CX-4945对U87细胞活性表现为增强，较高浓度（5.00、10.00、20.00 μmol/L）时表现为抑制。对照组、金松双黄酮组、CX-4945组及金松双黄酮联合CX-4945组U87细胞的存活率分别为（100.00±5.53）%、（71.96±2.10）%、（77.66±4.12）%、（42.56±4.22）%，差异具有统计学意义（
F=160.56，
P<0.001）；对照组与各处理组间的差异均具有统计学意义（均
P<0.001）；金松双黄酮联合CX4945处理组与金松双黄酮组、CX-4945组差异均具有统计学意义（均
P<0.001）。上述4组U87细胞的Caspase3/7活力分别为2.34±0.47、4.02±0.22、3.67±0.32、5.85±0.28，差异具有统计学意义（
F=55.80，
P<0.001）；各组的细胞凋亡率分别为（0.40±0.10）%、（17.37±0.57）%、（3.00±0.66）%、（33.47±0.87）%，差异具有统计学意义（
F=1 822.18，
P<0.001）；进一步两两比较发现，对照组与各处理组的Caspase3/7活力、细胞凋亡率差异均具有统计学意义（
P<0.001，
P=0.001，
P<0.001；
P<0.001，
P=0.001，
P<0.001）；金松双黄酮联合CX4945组与金松双黄酮组、CX-4945组的Caspase3/7活力、细胞凋亡率差异均具有统计学意义（均
P<0.001）。100.00 μmol/L金松双黄酮处理U87细胞后Notch1通路相关蛋白ICN1（0.55±0.07
vs. 1.01±0.09）、HES1（0.66±0.08
vs. 1.00±0.06）和DLL3（0.74±0.04
vs. 1.01±0.09）的蛋白相对表达量均降低，差异均具有统计学意义（
t=5.94，
P=0.004；
t=5.15，
P=0.007；
t=4.00，
P=0.016）。
结论:金松双黄酮可通过抑制Notch1信号通路，与CK2抑制剂CX-4945协同抑制胶质母细胞瘤U87细胞增殖，促进细胞凋亡。

关键词：胶质母细胞瘤、细胞增殖、细胞凋亡、受体，Notch1、金松双黄酮、CX-4945

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资助基金：中央高校基本科研业务费专项资金2042018kf0080;Fundamental Research Fund for the Central Universities2042018kf0080

在线出版日期：2023-05-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：321-326