10.3760/cma.j.cn371439-20210514-00142
GLDC通过PI3K/Akt/mTOR通路调控卵巢癌细胞的增殖与凋亡
目的:探究甘氨酸脱氢酶(GLDC)基因通过PI3K/Akt/mTOR调控卵巢癌细胞增殖与凋亡的机制。方法:采用RNA干扰技术沉默卵巢癌HEY、SK-OV-3细胞中GLDC的表达，分别将细胞分为si-control组、si-GLDC#1组和si-GLDC#2组，si-control组为转染siRNA-control的细胞，si-GLDC#1组为转染siRNA-GLDC#1的细胞，si-GLDC#2组为转染siRNA-GLDC#2的细胞。采用蛋白质印迹法检测GLDC蛋白表达水平以及PI3K/Akt/mTOR蛋白磷酸化水平，分别采用CCK-8法、Transwell小室迁移实验、细胞划痕实验和流式细胞仪检测细胞增殖、迁移和凋亡能力。结果:GLDC在卵巢癌HEY细胞si-control组、si-GLDC#1组和si-GLDC#2组中的相对表达量分别为1.00±0.01、0.68±0.10、0.80±0.08，差异有统计学意义(
F＝13.80，
P＝0.006)；GLDC在卵巢癌SK-OV-3细胞si-control组、si-GLDC#1组、si-GLDC#2组中的相对表达量分别为1.02±0.01、0.58±0.17、0.60±0.25，差异具有统计学意义(
F＝6.08，
P＝0.036)。si-control组、si-GLDC#1组和si-GLDC#2组3组HEY细胞培养24 h后吸光度(
A)值分别为1.04±0.03、0.91±0.02、0.82±0.01，48 h后分别为1.53±0.13、1.30±0.03、1.29±0.07，72 h后分别为1.44±0.08、1.25±0.01、1.15±0.03，差异均具有统计学意义(
F＝83.14，
P<0.001；
F＝8.96，
P＝0.007；
F＝29.55，
P<0.001)，进一步两两比较，24、48、72 h si-GLDC#1组、si-GLDC#2组细胞增殖活力均低于si-control组，差异均有统计学意义(均
P<0.05)。在HEY细胞中，si-control组、si-GLDC#1组、si-GLDC#2组迁移细胞数目分别为57.33±6.43、27.67±5.13、30.67±2.31，差异具有统计学意义(
F＝32.88，
P＝0.001)；si-GLDC#1组、si-GLDC#2组迁移细胞数较si-control组显著下降，差异均有统计学意义(
P<0.001；
P＝0.001)；在SK-OV-3细胞中也观察到类似结果。在SK-OV-3细胞中，si-control组、si-GLDC#1组、si-GLDC#2组的划痕愈合率分别为(51.27±1.59)%、(26.35±2.94)%、(26.34±7.69)%，差异具有统计学意义(
F＝26.54，
P＝0.001)；si-GLDC#1组、si-GLDC#2组细胞划痕愈合率较si-control组显著下降，差异均有统计学意义(均
P＝0.001)。在HEY细胞中，si-control组、si-GLDC#1组、si-GLDC#2组细胞凋亡率分别为(7.11±0.82)%、(10.44±1.50)%、(17.39±1.55)%，差异具有统计学意义(
F＝46.52，
P<0.001)；si-GLDC#1组、si-GLDC#2组细胞凋亡率较si-control组均显著上升，差异均有统计学意义(
P＝0.022；
P<0.001)；在SK-OV-3细胞中也观察到类似结果。在HEY细胞中，si-control组、si-GLDC#1组、si-GLDC#2组中PI3K总蛋白差异无统计学意义(
F＝0.54，
P＝0.631)，但pAkt/Akt、pmTOR/mTOR水平差异具有统计学意义(
F＝22.14，
P＝0.016；
F＝10.57，
P＝0.044)；其中si-GLDC#1组、si-GLDC#2组较si-control组pAkt/Akt、pmTOR/mTOR均显著降低(
P＝0.015，
P＝0.008；
P＝0.039，
P＝0.023)；在SK-OV-3细胞中也观察到类似结果。
结论:在卵巢癌细胞中，沉默GLDC可通过抑制PI3K/Akt/mTOR通路抑制细胞增殖并促进细胞凋亡。
卵巢肿瘤、细胞增殖、细胞运动、细胞凋亡、甘氨酸脱氢酶
48
国家自然科学基金81672838;北京市科技计划Z181100001718193;National Natural Science Foundation of China81672838;Science & Technology Commission of Beijing Municipal of ChinaZ181100001718193
2023-05-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
共7页
716-722
