10.3760/cma.j.cn371439-20210514-00141
IWR-1-endo通过抑制Wnt通路影响肝癌细胞的迁移和增殖
目的:探讨Wnt通路抑制剂IWR-1-endo对人肝癌细胞Huh7生物学行为的影响及作用机制。方法:体外培养人肝癌细胞Huh7,采用不同浓度(0、20、40、80、160、320 μmol/L)IWR-1-endo作用于Huh7细胞。采用划痕实验检测不同药物浓度下细胞迁移能力的变化;平板克隆实验检测细胞的增殖变化;蛋白质印迹法检测Wnt通路相关蛋白β-catenin表达的改变;免疫荧光染色检测β-catenin在细胞质和细胞核的表达情况。结果:划痕实验结果显示,0、20、40、80、160、320 μmol/L浓度的IWR-1-endo处理Huh7细胞24 h划痕愈合率分别为(20.55±0.05)%、(12.10±0.08)%、(9.36±0.10)%、(3.62±0.09)%、(0.62±0.04)%、(0.23±0.02)%,差异有统计学意义(
F=230.87,
P<0.001);进一步两两比较,各浓度间24 h划痕愈合率差异均具有统计学意义(均
P<0.001)。48 h划痕愈合率分别为(34.77±0.08)%、(17.69±0.05)%、(11.60±0.04)%、(5.68±0.07)%、(2.66±0.04)%、(1.75±0.02)%,差异有统计学意义(
F=589.68,
P<0.001);进一步两两比较,各浓度间48 h划痕愈合率差异均具有统计学意义(均
P<0.001)。经0、20、40、80、160、320 μmol/L浓度的IWR-1-endo处理肝癌Huh7细胞后,克隆形成率分别为(61.67±0.21)%、(57.33±0.11)%、(50.00±0.25)%、(36.67±0.28)%、(23.33±0.12)%、(15.00±0.08)%,差异有统计学意义(
F=403.56,
P<0.001);进一步两两比较,各浓度间的克隆形成率差异均具有统计学意义(均
P<0.001)。经0、20、40、80、160 μmol/L浓度的IWR-1-endo处理Huh7细胞24 h后,β-catenin的相对表达量分别为0.30±0.08、0.25±0.07、0.22±0.05、0.15±0.01、0.06±0.02,差异有统计学意义(
F=247.00,
P<0.001);与0 μmol/L相比,80、160 μmol/L浓度处理后的β-catenin的相对表达量差异均有统计学意义(
P=0.014;
P=0.008)。免疫荧光染色结果显示,与0 μmol/L相比,80 μmol/L IWR-1-endo处理后,Huh7细胞质和细胞核中的β-catenin表达均减少。
结论:Wnt通路抑制剂IWR-1-endo可通过抑制Wnt通路的活性抑制肝癌细胞Huh7的迁移和增殖,抑制作用均呈现剂量依赖性。
肝肿瘤、Wnt通路、IWR-1-endo、细胞增殖、细胞运动
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国家自然科学基金31971166;National Natural Science Foundation of China31971166
2023-05-30(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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