10.3760/cma.j.cn371439-20210813-00140
沉默PD-L1表达对胃癌细胞生物学行为的影响
目的:探讨程序性死亡受体配体-1(PD-L1)的表达对胃癌细胞MKN45生物学行为的影响。方法:采用RNA干扰技术,沉默胃癌细胞MKN45的PD-L1基因,将MKN45细胞分为空白对照组、si-NC组(转染siRNA-NC)及si-PD-L1组(转染siRNA-PD-L1)。采用实时定量PCR法检测各组MKN45细胞PD-L1及上皮间质转化(EMT)相关蛋白上皮钙黏素、波形蛋白、Snail的mRNA表达水平;采用蛋白质印记法检测各组MKN45细胞PD-L1蛋白的表达水平;采用Transwell小室迁移实验、Transwell小室侵袭实验及MTT实验检测MKN45细胞迁移、侵袭和黏附能力。结果:PD-L1在空白对照组、si-NC组、si-PD-L1组细胞中的mRNA相对表达量分别为1.002±0.092、1.005±0.121、0.237±0.017,差异具有统计学意义(
F=75.61,
P<0.001);PD-L1在3组细胞中的蛋白表达量分别为0.944±0.028、1.008±0.088、0.269±0.015,差异具有统计学意义(
F=172.99,
P<0.001);si-PD-L1组PD-L1的mRNA和蛋白表达均低于其他两组(均
P<0.001),而空白对照组和si-NC组之间差异均无统计学意义(均
P>0.05)。空白对照组、si-NC组和si-PD-L1组3组细胞的迁移率分别为(1.000±0.020)%、(1.012±0.084)%、(0.488±0.050)%,差异具有统计学意义(
F=80.73,
P<0.001);3组细胞的侵袭率分别为(0.929±0.087)%、(0.924±0.208)%、(0.300±0.100)%,差异具有统计学意义(
F=19.37,
P<0.001);3组细胞的黏附率分别为(100.000±5.407)%、(99.280±4.845)%、(59.723±2.674)%,差异具有统计学意义(
F=79.87,
P<0.001);与空白对照组和si-NC组相比较,si-PD-L1组MKN45细胞的迁移能力、侵袭能力及黏附能力均显著下降(均
P<0.001)。3组细胞上皮钙黏素mRNA相对表达量分别为1.000±0.023、0.981±0.051、3.618±0.201,波形蛋白mRNA相对表达量分别为1.000±0.043、1.108±0.150、0.328±0.011,Snail mRNA相对表达量分别为1.061±0.103、1.090±0.110、0.304±0.043,差异均具有统计学意义(
F=477.17,
P<0.001;
F=65.97,
P<0.001;
F=72.70,
P<0.001);与空白对照组和si-NC组相比较,si-PD-L1组MKN45细胞的波形蛋白及Snail的mRNA表达均降低,上皮钙黏素mRNA表达升高,差异均具有统计学意义(均
P<0.001)。
结论:沉默PD-L1的表达可降低MKN45细胞的迁移、侵袭及黏附能力,其机制可能与PD-L1影响胃癌EMT通路相关。
胃肿瘤、细胞运动、上皮间质转化、PD-L1
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2023-05-30(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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