TGF-β诱导肺脏癌相关成纤维细胞高表达IL-17D并促进MDSC募集

摘要：

目的:探讨TGF-β诱导肺脏癌相关成纤维细胞(CAF)表达IL-17D，并促进骨髓来源的抑制性细胞(MDSC)募集的关键机制。方法:采用C57BL/6小鼠建立B16黑色素瘤细胞肺癌转移模型(肿瘤模型组)，另设对照组，每组6只。应用流式细胞术(FACS)检测肿瘤小鼠肺脏CAF及其分泌IL-17D能力和MDSC比例的变化；采用ELISA和RT-qPCR检测肺肿瘤TGF-β水平的改变；FACS分选肺脏成纤维细胞，采用RT-PCR技术检测TGF-β对成纤维细胞分泌IL-17D、CCL2和CCL7的影响；Transwell检测TGF-β处理的肺脏成纤维细胞对MDSC的趋化作用。结果:肿瘤模型组肺脏CAF(CD45
-CD326
-CD31
-)比例显著高于对照组[(28.02±2.23)%
vs. (7.35±2.14)%，
t＝9.956，
P<0.001]。肿瘤模型组中CAF分泌IL-17D的能力较对照组显著升高[(38.27±2.93)%
vs. (19.04±3.16)%，t＝5.995，
P＝0.001]；肿瘤模型组肺脏MDSC比例明显高于对照组[(12.93±1.27)%
vs. (8.21±1.40)%，t＝4.804，
P＝0.009]。与对照组相比，肿瘤模型组肺脏TGF-β蛋白水平和转录水平均明显升高[(1 685.07±135.61)ng/L
vs. (1 047.98±68.50)ng/L，
t＝5.051，
P＝0.002；2.17±0.03
vs. 1.00±0.05，
t＝51.237，
P<0.001]。肺脏成纤维细胞经不同浓度TGF-β(0、5、10 μg/L)分别处理24 h后，其IL-17D mRNA相对表达量分别为0.42±0.01、0.67±0.01、0.84±0.04，CCL2 mRNA相对表达量分别为0.89±0.08、1.08±0.04、1.19±0.01，CCL7 mRNA相对表达量分别为0.53±0.05、0.65±0.04、0.74±0.03，随着TGF-β浓度升高，成纤维细胞IL-17D、CCL2、CCL7表达水平明显升高(
F＝57.384，
P<0.001；
F＝15.802，
P＝0.004；
F＝14.544，
P＝0.005)。另外，与对照组相比(TGF-β为0 μg/L)，肺脏成纤维细胞经10 μg/L TGF-β处理24 h后，可促进肿瘤小鼠脾脏MDSC的迁移[(9.59±0.21)%
vs. (2.14±0.24)%，
t＝6.585，
P<0.001]。
结论:肿瘤微环境中TGF-β诱导肺脏CAF高表达IL-17D，是促进CCL2、CCL7表达和MDSC迁移的重要因素。

关键词：肿瘤微环境、转化生长因子β、癌相关成纤维细胞、白细胞介素-17D、骨髓来源的抑制性细胞

所属期刊栏目：48

资助基金：国家自然科学基金82074088、81573728;National Natural Science Foundation of China82074088, 81573728

在线出版日期：2023-05-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：275-281