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10.3760/cma.j.cn371439-20190929-00043

CXCL10和miR-34c-5p在乳腺浸润性导管癌中的靶向作用

引用
目的:探讨乳腺浸润性导管癌中CXC趋化因子配体10(CXCL10)与miR-34c-5p的靶向调控关系。方法:收集2016年3月至2017年3月在中山大学附属第三医院行手术切除且经病理确诊的乳腺浸润性导管癌组织( n=56)和乳腺良性组织( n=14),采用HTA2.0和miRNA4.0芯片检测CXCL10和miR-34c-5p在两组中的表达并用反转录实时荧光定量PCR(RT-qPCR)进行验证;采用Pearson相关分析两者表达的相关性并用IPA软件预测靶向关系;采用双荧光素酶报告基因系统验证二者的作用靶点,最后在乳腺癌细胞株MCF-7、ZR-75-30中进一步验证。 结果:基因芯片检测结果显示,CXCL10 mRNA在乳腺浸润性导管癌组织和乳腺良性组织中的表达量分别为7.135±1.350和4.348±0.722,miR-34c-5p mRNA在两组中的表达量分别为1.309(1.001,2.055)和3.948(3.278,4.371),差异均有统计学意义( t=7.628, P<0.001; Z=-4.405, P<0.001);Pearson相关分析显示,CXCL10 mRNA和miR-34c-5p mRNA的表达呈负相关( r=-0.327, P=0.004)。CXCL10 mRNA的表达与乳腺浸润性导管癌患者人表皮生长因子受体-2( t=2.415, P=0.019)和Ki-67( t=2.483, P=0.016)的表达有关;miR-34c-5p mRNA的表达与乳腺浸润性导管癌患者组织学分级( χ2=8.626, P=0.013)和雌激素受体/孕激素受体( Z=-2.195, P=0.028)的表达有关。RT-qPCR结果显示,CXCL10 mRNA在乳腺浸润性导管癌组织和乳腺良性组织中的相对表达水平分别为6.059±1.714和1.000±0.232,miR-34c-5p的相对表达水平分别为0.093±0.004和1.000±0.244,差异均有统计学意义( t=3.484, P=0.002; t=5.112, P<0.001),该结果与芯片检测结果一致。双荧光素酶报告基因结果表明,过表达miR-34c-5p后,在MCF-7细胞中WT-CXCL10和MUT-CXCL10报告载体的荧光素酶活性分别为1.117±0.040和1.647±0.031;在HeLa细胞中,两者的荧光素酶活性分别为0.885±0.051和1.430±0.020,差异均有统计学意义( t=18.120, P<0.001; t=24.040, P<0.001)。分别转染miR-34c-5p和miR-NC后,ZR-75-30细胞中CXCL10的相对表达水平分别为0.008±0.000和0.012±0.000;MCF-7细胞中CXCL10的相对表达水平分别为0.315±0.000和0.386±0.004,差异均有统计学意义( t=20.384, P<0.001; t=3.473, P=0.026)。 结论:miR-34c-5p在乳腺浸润性导管癌中表达下调,而CXCL10表达上调;CXCL10是miR-34c-5p的靶基因。

乳腺肿瘤、CXC趋化因子配体10、miR-34c-5p

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深圳市科技计划JCYJ20170307165048482;Shenzhen Science and Technology PlanJCYJ20170307165048482

2023-05-30(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)

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1673-422X

37-1439/R

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