多西他赛诱导的多倍体肿瘤细胞在肿瘤复发中的作用

摘要：

目的:研究多西他赛诱导的多倍体肿瘤细胞迁移、上皮间质转化特性及免疫细胞对其杀伤作用，以探讨多倍体肿瘤细胞在肿瘤复发中的潜在作用。方法:使用1 μmol/L多西他赛处理人非小细胞肺癌A549细胞24 h后收集的细胞为Doc 1 d组，撤除药物，细胞继续在新鲜的完全培养基中培养至第3天或第5天后收集的细胞分别为Doc 3 d组和Doc 5 d组，以DMSO处理A549细胞24 h作为对照组。采用免疫荧光染色法检测细胞形态，流式细胞术检测细胞倍性，划痕实验检测细胞迁移能力，Western blotting检测细胞上皮间质转化相关蛋白的表达，乳酸脱氢酶释放法评估细胞因子诱导杀伤(CIK)细胞的杀伤活性。结果:与对照组相比，Doc 1 d组、Doc 3 d组、Doc 5 d组细胞多数发生凋亡，少数存活的细胞体积明显增大，且细胞核呈多核状态。对照组、Doc 1 d组、Doc 3 d组、Doc 5 d组多倍体细胞亚群(DNA含量>4N)比例分别为(1.93±0.55)%、(22.97±2.37)%、(51.30±12.51)%、(67.87±8.31)%，4组间差异具有统计学意义(
F＝26.521，
P<0.001)，Doc 1 d组、Doc 3 d组、Doc 5 d组多倍体细胞亚群比例均明显高于对照组，差异均具有统计学意义(均
P<0.001)，且随着撤药时间的延长，Doc 3 d组、Doc 5 d组多倍体细胞亚群比例明显高于Doc 1 d组，差异均具有统计学意义(
P＝0.009；
P＝0.004)。对照组细胞在培养24 h、48 h后，伤口愈合率均达100%；Doc 3 d组在培养24 h、48 h后，伤口愈合率分别为(39.10±2.12)%、(46.13±5.32)%，差异无统计学意义(
t＝2.126，
P＝0.051)；与对照组24 h、48 h相比，Doc 3 d组细胞迁移能力明显降低，差异均具有统计学意义(
t＝49.756，
P<0.001；
t＝30.825，
P<0.001)。与对照组相比，Doc 1 d组、Doc 3 d组和Doc 5 d组细胞中E-cadherin蛋白表达逐渐下调，Vimentin蛋白表达逐渐上调，Snail蛋白、N-cadherin蛋白表达均未发生明显改变。CIK细胞对对照组、Doc 3 d组、Doc 5 d组细胞的杀伤效率分别为(27.27±1.91)%、(17.87±2.35)%、(9.47±0.51)%，3组间差异具有统计学意义(
F＝11.294，
P<0.001)，Doc 3 d组、Doc 5 d组细胞的杀伤效率明显低于对照组，差异均具有统计学意义(
P＝0.004；
P<0.001)，Doc 5 d组细胞的杀伤效率明显低于Doc 3 d组，差异具有统计学意义(
P＝0.003)。
结论:多西他赛诱导的多倍体肿瘤细胞迁移能力减弱，但易发生上皮间质转化，且免疫细胞对其杀伤作用降低。

关键词：癌，非小细胞肺、多倍体肿瘤细胞、多西他赛、上皮间质转化

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资助基金：辽宁省科学技术计划2019JH8/10300082;Science and Technology Plan of Liaoning Province of China2019JH8/10300082

在线出版日期：2023-05-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：340-345