miR-193b表达上调对HBV阳性肝癌细胞的影响

摘要：

目的 探讨微小RNA-193b(miR-193b)表达上调对乙型肝炎病毒(HBV)阳性肝癌细胞凋亡、侵袭和转移的影响.方法 HepG2.2.15细胞株培养至对数生长期后,以25、50、100pmol的miR-193b mimic进行转染,对照组以空白mimic进行转染(0pmol).48 h后采用实时定量荧光聚合酶链反应(qRT-PCR)检测各组细胞中miR-193b的表达,流式细胞仪检测各实验组细胞凋亡率,细胞划痕实验检测细胞迁移能力,Transwell实验检测细胞侵袭能力,Western blotting检测Bax、Bcl-2、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)和基质金属蛋白酶-2(MMP-2)蛋白表达.结果 qRT-PCR结果显示,miR-193b mimic (25、50、100 pmol)转染组和对照组HepG2.2.15细胞株中miR-193b表达量分别为1.05±0.09、1.53±0.12、2.08±0.17和0.49±0.12,4组间差异有统计学意义(F =261.35,P＜0.001),各转染组与对照组相比,miR-193b表达明显增加(P =0.036;P=0.029;P=0.022).流式细胞仪检测结果显示,miR-193b mimic(25、50、100 pmol)转染组和对照组HepG2.2.15细胞凋亡率分别为(30.28±5.22)％、(53.41±6.18)％、(79.89±7.13)％和(1.02±0.13)％,4组间差异有统计学意义(F=357.19,P＜0.001),各转染组与对照组相比,细胞凋亡率明显增强(P =0.025;P=0.010;P=0.007).细胞划痕实验结果显示,miR-193b mimic(25、50、100pmol)转染组和对照组细胞迁移距离分别为(27.53±1.54) mm、(19.24±2.12)mm、(13.42±1.53)mm和(34.95±1.92) mm,4组间差异有统计学意义(F=408.62,P＜0.001),各转染组与对照组相比,细胞迁移距离明显减小(P =0.032;P=0.007;P=0.006).Transwell实验结果显示,miR-193b mimic(25、50、100 pmol)转染组和对照组细胞吸光度值分别为1.02±0.12、0.59±0.13、0.42±0.10和1.68±0.16,4组间差异有统计学意义(F=511.68,P＜0.001),各转染组与对照组相比,细胞侵袭能力明显减弱(P =0.028;P =0.005;P =0.002).Western blotting检测结果显示,miR-193bmimic(25、50、100 pmol)转染组和对照组HepG2.2.15细胞Bax、Bcl-2、MMP-9和MMP-2蛋白表达差异均有统计学意义(F =264.38,P＜0.001;F=437.19,P＜0.001;F=377.46,P＜0.001;F=208.79,P＜0.001),进一步两两比较,各转染组与对照组Bax、Bcl-2、MMP-9和MMP-2蛋白表达差异均有统计学意义(均P＜0.05).结论 miR-193b可诱导HBV阳性肝癌细胞凋亡,抑制HBV阳性肝癌细胞侵袭和转移,其机制可能与调控Bax、Bcl-2、MMP-9、MMP-2等蛋白表达有关.

关键词：肝炎病毒、乙型、肝肿瘤、微RNAs、肿瘤浸润

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资助基金：四川省卫生和计划生育委员会课题17PJ587Found of Health and Family Planning Commission of Sichuan Province of China 17PJ587

在线出版日期：2019-06-04（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：77-81