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10.3760/cma.j.issn.1673-422X.2017.01.001

Pyk2基因对肝癌He p3 B细胞增殖、侵袭和迁移的影响

引用
目的:探讨沉默富含脯氨酸的酪氨酸激酶2(Pyk2)基因对人肝癌Hep3 B细胞增殖、侵袭及迁移的影响。方法构建Pyk2基因RNA干扰(RNAi)载体,脂质体转染至肝癌Hep3B细胞,实验分3组,Pyk2 RNA干扰组(siRNA组):转染携带Pyk2基因RNAi的质粒;阴性对照组:转染不携带Pyk2基因RNAi的空载质粒;空白对照组:未转染任何质粒。应用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)及Western blotting鉴定Pyk2基因和蛋白表达;采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)、Transwell侵袭和划痕实验分别检测细胞增殖、侵袭及迁移等生物学特性。结果 Pyk2基因干扰后肝癌 Hep3B 细胞 Pyk2 mRNA 的表达(0.16±0.03)较阴性对照组(0.74±0.13)和空白对照组(0.77±0.16)均明显下降,差异均有统计学意义(t=51.46,P=0.000;t=53.21,P=0.000)。Pyk2基因干扰后肝癌 Hep3B 细胞 Pyk2蛋白的表达(0.24±0.06)较阴性对照组(0.83±0.05)和空白对照组(0.91±0.06)均明显下降,差异均有统计学意义(t=57.29,P=0.000;t=68.53,P=0.000)。siRNA组48 h细胞增殖抑制率(26.17%±0.28%)较阴性对照组(9.28%±0.22%)和空白对照组(6.47%±0.31%)明显提高,差异均有统计学意义(t =31.45,P=0.004;t=34.64,P=0.002)。siRNA组细胞的穿膜细胞数(32.5±8.5)/10 HP明显低于阴性对照组(98.4±12.3)/10 HP和空白对照组(112.6±11.3)/10 HP,差异有统计学意义(t=95.64,P=0.000;t=105.17,P =0.000)。siRNA 组的划痕愈合率(28.17%±1.46%)显著低于阴性对照组(77.38%±2.24%)和空白对照组(79.41%±3.17%),差异有统计学意义(t =85.86,P=0.000;t =89.37,P=0.000)。结论 Pyk2基因参与肝癌Hep3B细胞的增殖、侵袭及迁移,与肿瘤发展、侵袭、转移等密切相关,Pyk2有望成为肝癌诊断和治疗的分子靶标。

肝肿瘤、细胞增殖、肿瘤浸润、RN A干扰、富含脯氨酸的酪氨酸激酶2

44

R73;R5

滨州市科技发展计划2014ZC0128

2017-02-14(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)

共5页

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国际肿瘤学杂志

1673-422X

37-1439/R

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2017,44(1)

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