10.3760/cma.j.issn.1673-422X.2016.03.001
S100A6基因干扰对A549肺腺癌细胞生物学行为的影响
目的 探讨S100A6基因干扰对A549肺腺癌细胞生物学行为的影响.方法 构建S100A6基因RNAi载体,慢病毒转染A549肺腺癌细胞,共分为3组,①空载体对照组:转染不携带S100A6基因RNAi的空载质粒;②阴性对照组:未转染任何质粒;③S100A6 RNA干扰组:携带S100A6基因RNAi的质粒.应用实时聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blotting鉴定S100A6基因和蛋白表达;采用四甲基偶氮唑蓝、迁移试验和流式细胞仪分别检测细胞增殖、浸润、细胞周期及细胞凋亡等生物学特性.结果 S100A6基因干扰后A549肺腺癌细胞S100A6 mRNA的表达(0.009±0.001)较阴性对照组(0.049 ±0.005)和空载体对照组(0.030 ±0.006)均有明显下降,差异均有统计学意义(=57.56,P=0.000;t=48.21,P=0.000).S100A6基因干扰后A549肺腺癌细胞S100A6蛋白的表达(0.107±0.002)较阴性对照组(0.341 ±0.005)和空载体对照组(0.311 ±0.006)均有明显下降,差异均有统计学意义(t=37.34,P=0.000;=27.51,P=0.001).48 h细胞增殖能力:RNA干扰组(0.230 ±0.008)较阴性对照组(0.292 ±0.038)和空载体对照组(0.307 ±0.013)降低,差异均有统计学意义(t=25.31,P=0.003;t=29.42,P=0.001).细胞浸润能力:RNA干扰组细胞的穿膜细胞数(11.40个±1.36个)较阴性对照组(26.80个±1.83个)和空载体对照组(25.80个±1.93个)降低,差异有统计学意义(t=29.44,P=0.001;t=23.17,P=0.005).细胞周期:RNA干扰组的S期细胞比例(28.26%±0.38%)显著低于空载体对照组(44.73%±0.66%)和阴性对照组(45.15%±1.69%),差异有统计学意义(t=63.69,P=0.000;t =71.55,P=0.000),RNA干扰组的G2-M期细胞比例(26.99%±0.29%)显著高于阴性对照组(13.26% ±0.49%)和空载体对照组(12.41%±0.46%),差异有统计学意义(t=56.31,P=0.000;t =51.39,P=0.000).RNA干扰组细胞凋亡率(8.90%±0.48%)与阴性对照组(5.84%±0.21%)和空载体对照组(5.99%±0.37%)比较,差异均有统计学意义(t=51.34,P=0.000;t=47.27,P=0.000).结论 S100A6基因参与肺腺癌细胞的增殖、浸润、细胞周期、细胞凋亡等生物学过程,与肿瘤发生、发展、转移等密切相关,有望作为肺腺癌诊断和治疗新的分子靶标.
肺肿瘤、细胞增殖、RNA干扰、浸润、S100A6基因
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R730.21;R363;R587.1
2016-04-06(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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