Notch1表达下调对RPMI-8226骨髓瘤细胞荷瘤小鼠血管新生的抑制作用

摘要：

目的 探讨Notch1 siRNA对体内外RPMI-8226人骨髓瘤细胞及荷瘤小鼠血管新生及肿瘤生长的影响.方法 体外采用Notch1 siRNA转染RPMI-8226细胞,ELISA方法检测细胞上清VEGF分泌变化,Western blotting检测各组细胞Notch1、VEGF蛋白表达变化;将RPMI-8226细胞皮下注射于糖尿病抵抗/重症联合免疫缺陷小鼠,建立人多发性骨髓瘤小鼠移植瘤模型,将成瘤小鼠随机分为3组:NS组(Notch1 siRNA转染)、CS组(Control siRNA转染)、UN组(未转染),观察各组肿瘤体积变化,免疫组织化学染色法观察Notch1、VEGF及CD34变化.结果 Notch1 siRNA有效下调RPMI-8226细胞Notch1、VEGF蛋白表达;与CS组比较,在转染后48、72 h,NS组细胞培养上清液VEGF分泌量均明显下降[(120 ±25)ng/L∶ (175±15)ng/L,t =3.27,P＜0.05;(145 ±24)ng/L∶ (295±17)ng/L,t =8.83,P＜0.01)];NS组肿瘤体积明显减小,13、17、21 d与CS组比较差异均有统计学意义[(1 548±218)mm3:(1 820±64)mm3,t =2.68,P＜0.05;(1 200±75)mm3∶(2 180±84)mm3,t =19.46,P＜0.01;(1 150±88)mm3∶(2250±145)mm3,=14.50,P＜0.01];Notch1 siRNA降低移植瘤Notch1及VEGF蛋白表达,Notch1、VEGF在NS组和CS组表达的差异具有统计学意义[(16.33±2.52)％∶(75.33±2.52)％,t=28.71,P＜0.01;(5.00±1.00)％∶(29.67±2.08)％,=18.50,P＜0.01];Notch1 siRNA降低移植瘤新生血管数量,NS组微血管密度显著少于CS组[(14.67±2.52)∶(30.00±5.00),t=4.74,P＜0.01].结论 体外实验证实Notch1 siRNA可以降低人骨髓瘤细胞RPMI-8226细胞上清VEGF分泌,体内实验证实Notch1 siRNA可以减小荷瘤多发性骨髓瘤小鼠肿瘤体积、减少移植瘤新生血管数量,提示Notch1是抗骨髓瘤血管新生的有效分子靶点.

关键词：多发性骨髓瘤、血管内皮生长因子类、RNA、小分子干扰、受体、Notch1

所属期刊栏目：42

分类号：R735.1;R363.2;R562.25

资助基金：山东省自然科学基金;山东省自然科学基金;山东省优秀中青年科学家科研奖励基金

在线出版日期：2015-10-16（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：661-665