10.3760/cma.j.issn.1673-422X.2015.03.001
微小RNA-27 a对黑色素瘤WM239细胞增殖和凋亡的影响
目的:探讨微小RNA-27a( miR-27a)模拟物和抑制物转染黑色素瘤WM239细胞后对细胞增殖和凋亡的影响。方法将miR-27a模拟物、抑制物及其阴性对照转染WM239细胞,荧光显微镜观察转染效率,实时荧光定量PCR检测相应的微小RNA,四甲基偶氮唑盐( MTT)法检测细胞增殖,流式细胞仪检测细胞凋亡和细胞周期。结果细胞转染效率为80%~90%。转染miR-27a模拟物后,细胞内miR-27a表达量明显上升(2-△△CT值为26.98±0.01),与正常对照组相比差异有统计学意义( t=-1123.67,P=0.00);转染miR-27a抑制物后,细胞中miR-27a的表达量下降(2-△△CT值为0.96±0.02),与正常对照组相比差异无统计学意义(t=4.04,P=0.06)。转染miR-27a模拟物后,细胞增殖受到明显抑制,与正常对照组相比差异具有统计学意义[72 h吸光度(0.45±0.02)∶(0.72±0.01),F=129.56,P﹤0.05]。miR-27a模拟物组G0-G1期的细胞比例升高[(74.83±1.46)∶(63.73±1.25),F=30.33,P﹤0.05],S期和G2-M期细胞比例减少[(21.33±1.75)∶(27.50±1.25),F=14.98,P﹤0.05;(3.90±1.31)∶(8.80±2.10),F=3.66,P﹤0.05];模拟物组细胞凋亡率与正常对照组相比明显增加[(29.67±0.91)%∶(1.44±0.85)%, F=530.90,P﹤0.01];而抑制物组对细胞周期和凋亡无明显作用。结论 miR-27a抑制黑色素瘤细胞增殖,具有抑瘤作用,这与其促进细胞凋亡,阻滞细胞周期于G0-G1期相关。
黑色素瘤、细胞增殖、细胞凋亡、转染、微小RNA-27a
山东省自然科学基金ZR2010CM067;山东省大型科学仪器设备升级改造技术研究专项2013SJGZ09
2015-05-26(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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