肿瘤射频消融裂解物负载的DC-CIK细胞体外抗肿瘤活性实验研究

摘要：

目的 研究负载射频消融肿瘤原位裂解物的树突状细胞(DC)联合细胞因子诱导杀伤活性细胞(CIK)体外抗肿瘤活性.方法 制备BALB/C小鼠脾脏来源的CIK细胞及骨髓来源的DC,建立射频消融灭活小鼠皮下结肠癌的实验模型,将其原位裂解的肿瘤组织反复冻融后取上清,lowry蛋白定量法定量,以终浓度5 μg/ml载培养第5天的DC(即Ag-DC),2d后再与培养第7天的CIK细胞共培养48 h,流式细胞术分析其表面共刺激分子的表达,细胞增殖与毒性检测试剂盒(CCK-8试剂盒)检测其体外杀伤活性.结果 DC表面分子表达共刺激分子CD86+ CD11c+、MHCⅡ+CD11c+、MHCⅡ+CD80+双阳性细胞百分含量分别为9.50％、42.4％、53.4％;Ag-DC表面分子表达共刺激分子双阳性细胞百分含量明显提高,分别为19.2％、74.2％、61.1％.CIK细胞培养第1天,CD3+ NK1.1+双阳性的百分含量为1.45％,第7天CD3+ NK1.1+双阳性表达明显提高为36.9％.Ag-DC-CIK细胞对结肠癌细胞C26的杀伤活性明显高于DC-CIK、CIK细胞,且相同效靶比下前者的杀伤活性明显高于后者.效靶比为5∶1时,Ag-DC-CIK细胞杀伤率为(74.9±3.5)％,DC-CIK细胞杀伤率为(71.2±2.1)％,CIK细胞杀伤率为(68.7±2.9)％,差异有统计学意义(F =7.007,P=0.007);效靶比为10∶1时,Ag-DC-CIK细胞杀伤率为(82.3±4.5)％,DC-CIK细胞杀伤率为(77.1±5.1)％,CIK细胞杀伤率为(72.7±2.8)％,差异有统计学意义(F=7.727,P=0.005);效靶比为20∶1时,Ag-DC-CIK细胞杀伤率为(83.2±1.9)％,DC-CIK细胞杀伤率为(77.2±4.2)％,CIK细胞杀伤率为(73.0±2.6)％,差异有统计学意义(F=16.594,P=0.000).结论 负载肿瘤射频消融原位裂解产物的DC联合CIK细胞可以提高体外细胞毒活性,为肿瘤综合治疗提供新策略.

关键词：树突细胞、结肠肿瘤、射频消融

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资助基金：国家自然科学基金81171653、30972703、81201741;江苏省自然科学基金BK2011246、BK2011247;六大人才高峰第六批资金BRA2010037

在线出版日期：2014-08-19（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：471-475