10.3760/cma.j.issn.1673-422X.2008.12.023
CRKL基因RNA干扰慢病毒载体的构建与鉴定
目的 构建CBKL基因RNA干扰(RNAi)慢病毒载体.方法 将筛选确定的CRKL基因RNAi有效靶序列克隆到pGCL-GFP载体[含U6启动子和绿色荧光蛋白(GFP)]连接产生LV-shCRKL慢病毒载体.通过酶切、测序验证后,用LV-shCRKL、pHelper 1.0和pHelper2.0质粒共转染包装细胞293T细胞,包装产生慢病毒,以293T细胞GFP蛋白的表达水平测定病毒滴度.结果 载体片段插入正确.共转染包装细胞293T能产生高浓度的重组慢病毒LV-shCRKL.结论 成功构建了人CRKL基因RNAi病毒载体.
RNA干扰、磷酸酪氨酸、信号传导
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R342.2(人体生物化学、分子生物学)
2009-03-27(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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