抗体药物残留蛋白质A定量检测试剂盒的开发

摘要：

目的:制备能特异识别蛋白质A的多克隆抗体(多抗)，以构建快速、高效、准确的抗体药物中残留蛋白质A定量检测试剂盒。方法:使用标准蛋白质A样品进行动物免疫，获得特异性识别蛋白质A的兔多抗；标记兔多抗并进行抗体配对测试，构建夹心ELISA试剂盒，优化试剂盒检测样品的处理方法，并对试剂盒的稳定性、耐用性、钩状效应、适用性等进行验证。结果:多抗制备前对蛋白质A进行热处理11 min时释放率最高，1#多抗作为包被抗体和2#-Bio作为检测抗体组合构建的试剂盒能够准确检测出蛋白质A，灵敏度达0.03 ng/ml，在4 ℃条件下可保存1年。不同反应时间、不同反应温度下的标准曲线的决定系数均大于0.99。检测7款产品的回收率均在80%～120%之间，对应标准曲线的决定系数均大于0.99。高浓度测试试剂盒时所得光密度值高于标准曲线最高浓度10 ng/ml的值，待申报样品检测值与回算值一致。结论:成功构建了残留蛋白质A的定量检测试剂盒，该试剂盒的稳定性、耐用性、适用性良好，且无钩状效应。

关键词：抗体药物、抗体Fc片段融合蛋白、蛋白质A、残留量、多克隆抗体、双抗夹心法酶联免疫吸附试验、试剂盒

所属期刊栏目：47

分类号：R917(药物基础科学)

在线出版日期：2024-11-18（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：223-229