基于细胞感染的实时定量逆转录PCR检测水痘减毒活疫苗病毒滴度方法的建立

摘要：

目的:建立基于细胞感染的实时定量逆转录PCR(real time quantitative reverse-transcription PCR，RT-qPCR)法，用于水痘减毒活疫苗感染性病毒滴度检测。方法:根据水痘减毒活疫苗毒种V-Oka株的基因序列设计特异性引物及探针。将参考品及待测样品系列稀释后接种MRC-5细胞，经培养后收获细胞，提取RNA，进行一步法RT-qPCR检测，通过平行线法计算样品滴度，并将检测结果与中国药典2020年版三部规定的空斑法进行对比。结果:感染细胞适宜收获时间为36~48 h，可检测样品滴度范围为2.8~5.0 lgPFU/ml。与空斑法检测的滴度之间的差异无统计学意义(冻干疫苗组
t＝1.09，疫苗原液组
t＝0.59，
P值均>0.05)。
结论:初步建立了基于细胞感染的RT-qPCR法，可用于水痘减毒活疫苗病毒滴度检测。

关键词：实时定量逆转录聚合酶链反应、水痘减毒活疫苗、滴度

所属期刊栏目：46

分类号：R511.5(传染病)

在线出版日期：2023-05-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：50-54