10.3760/cma.j.cn311962-20221014-00065
基于细胞感染的实时定量逆转录PCR检测水痘减毒活疫苗病毒滴度方法的建立
目的:建立基于细胞感染的实时定量逆转录PCR(real time quantitative reverse-transcription PCR,RT-qPCR)法,用于水痘减毒活疫苗感染性病毒滴度检测。方法:根据水痘减毒活疫苗毒种V-Oka株的基因序列设计特异性引物及探针。将参考品及待测样品系列稀释后接种MRC-5细胞,经培养后收获细胞,提取RNA,进行一步法RT-qPCR检测,通过平行线法计算样品滴度,并将检测结果与中国药典2020年版三部规定的空斑法进行对比。结果:感染细胞适宜收获时间为36~48 h,可检测样品滴度范围为2.8~5.0 lgPFU/ml。与空斑法检测的滴度之间的差异无统计学意义(冻干疫苗组
t=1.09,疫苗原液组
t=0.59,
P值均>0.05)。
结论:初步建立了基于细胞感染的RT-qPCR法,可用于水痘减毒活疫苗病毒滴度检测。
实时定量逆转录聚合酶链反应、水痘减毒活疫苗、滴度
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R511.5(传染病)
2023-05-30(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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