10.3760/cma.j.cn311962-20220729-00044
Sabin株脊髓灰质炎灭活疫苗Vero细胞DNA残留定量PCR检测法的验证
目的:验证Sabin株脊髓灰质炎灭活疫苗中Vero细胞DNA残留定量PCR(quantitative PCR,qPCR)检测法。方法:用试剂盒提取Sabin株脊髓灰质炎灭活疫苗原液的DNA,采用qPCR检测Vero细胞DNA,并验证方法的线性、专属性、准确性、精密度、耐用性及定量限;同时采用DNA探针杂交法检测样品。结果:qPCR检测Vero细胞DNA标准曲线在0.003 0~300.000 0 pg/μl之间线性良好;对Hep-2细胞、大肠埃希菌、酵母细胞DNA均无扩增反应;高、中、低浓度样品加标回收率在50%~150%,准确性良好;定量检出限为0.003 0 pg/μl;精密度良好(相对标准偏差<15%);反应体系配制好后置于2~8 ℃ 30 min后进行检测,相对标准偏差<15%,耐用性良好。DNA探针杂交法与qPCR结果均小于0.1 pg/μl。结论:qPCR检测Sabin株脊髓灰质炎灭活疫苗中Vero细胞DNA残留具有良好的线性、专属性、准确性、精密度和耐用性,可适用于该项检测。
Vero细胞DNA残留、定量聚合酶链反应、DNA探针杂交法
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R392-3
2023-05-30(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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